绿色天然植物提取物抗草鱼呼肠孤病毒的研究

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草鱼在我国淡水养殖品种中占重要的市场份额,年产量达到360万吨。草鱼呼肠孤病毒(Grasscarpreovirus,GCRV)是已知的能够造成草鱼爆发性疫病的最主要的病原之一。其感染导致的草鱼出血病具有高传染性、高致死性,一直以来被视为我国淡水养殖中最突出的问题之一。在前期的研究中,本课题组利用酵母双杂交技术、Pulldown和Dotblot overlay等技术证实了草鱼层粘连蛋白受体(LamR)能够与GCRV-VP5相互作用介导GCRV进入宿主细胞。本实验以LamR蛋白为药物靶点开展研究,筛选与其相互作用的天然植物源化合物,发现GT1能够有效封闭LamR蛋白阻断GCRV侵染宿主细胞。实验证实不同浓度的GT1封闭细胞后,能够有效的抑制GCRV在CIK细胞中的增殖。利用Real-Time PCR技术,分析上清中GCRV病毒量的差异。定量结果显示,随着实验组中GT1浓度的增加,上清中GCRV病毒拷贝数呈明显下降趋势。本实验进一步开展了GT1在鱼体水平抗病毒效果,药物代谢情况以及对草鱼的安全使用浓度等。
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