持续静态压力对大鼠颈椎椎体生长板软骨细胞凋亡的诱导并探讨其信号转导机制

来源 :江西省骨科高峰论坛暨骨科学分会第十六次年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mecdull
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背景:诱导软骨细胞凋亡的持续静态压力的幅度和持续时间尚不明确,且持续静态压力诱导的软骨细胞凋亡的信号转导机制目前仍不清楚. 目的:建立一个持续静态压力诱导的颈椎椎体生长板软骨细胞凋亡的模型,并探讨bcl-2、bax、caspase-3和cytochrome c在其中的作用. 方法:取4周龄SD大鼠的颈椎椎体生长板软骨进行体外分离、培养软骨细胞.原代细胞传代后采用Ⅱ型胶原免疫荧光法对软骨细胞进行鉴定,采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法绘制细胞生长曲线.将软骨细胞放置在压力装置中,采用不同静态压力(0、0.1、0.2、0.4MPa)和不同持续时间(1、6、12、24h)作用后,CCK-8法检测细胞存活率,TUNEL染色法检测细胞凋亡率,Western blot检测bcl-2、bax、caspase-3和cytochrome c的表达. 结果与结论:在持续静态压力大于或等于0.2MPa、作用时间大于或等于12h的条件下,软骨细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.05),且随着静态压力的增大或者加压时间的延长,与对照组相比,各实验组细胞凋亡率呈压力或时间依赖性增高(P<0.05),抗凋亡蛋白bcl-2表达降低,促凋亡蛋白bax、caspase-3表达增高,cytochrome c活性亦增加.
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