【摘 要】
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目的:探讨原发惟胃癌分子细胞遗传学的变化。方法:用比较基因组杂交(comparative genomiehybridazion,CGH)检测原发性胃癌DNA拷贝数变化;用六个微卫星位点分析胃癌18q21杂合性丢失(loss ofheterozygosity,LOH),用单链构象多态性(PCR-SSCP)和直接测序检测18q上SMAD2、DPCA和DCC三个抑癌基因的突变;用半定量和实时荧光定量PC
【机 构】
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上海第二医科大学附属瑞金医院上海消化外科研究所,上海,200025 上海第二医科大学附属瑞金医院上
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目的:探讨原发惟胃癌分子细胞遗传学的变化。
方法:用比较基因组杂交(comparative genomiehybridazion,CGH)检测原发性胃癌DNA拷贝数变化;用六个微卫星位点分析胃癌18q21杂合性丢失(loss ofheterozygosity,LOH),用单链构象多态性(PCR-SSCP)和直接测序检测18q上SMAD2、DPCA和DCC三个抑癌基因的突变;用半定量和实时荧光定量PCR检测20q上ZNF217、BTAK和CAS三个癌基因扩增情况。
结果:CGH发现胃癌常见扩增区域(>20％)有8q,20q,17q,3q,7q,11q,13q,1q和20p,高水平扩增区域有8q,1q21-25,3q26-29和16q11-13。常见丢失区域(>20％)有17p,18q,5q,8p和9p。18q21上六个位点中至少一个位点出现LOH的频率为78％(39/50)。D18S450LOH发生率最高,达48.9％,最小共同丢失区位于D18S450和D18474问。18q21 LOH多见于淋巴结转移和TNMⅢ期和Ⅳ期胃癌病人。胃癌中SMAD2和DPCA无突变,DCC突变率为24.49％(12/49)。胃窦部癌DCC突变率高于胃体和贲门部癌,TNMⅢ期和Ⅳ期胃癌突变率高于TNM Ⅰ期和Ⅱ期。ZNF217扩增率为11.36％,多见于直径≥5 cm和肠型胃癌。胃癌中BTAK和CAS基因相对拷贝数显著高于正常胃粘膜,扩增率分别为16.67％和29.73％。CAS扩增多见于淋巴结转移者。
结论:原发性胃癌中有多处染色体区域发生DNA拷贝数畸变,这些区域中可能存在与胃癌发生发展相关的癌基因和抑癌基因,是定位克隆胃癌相关基因的候选区域。胃癌中18q21存在高频LOH,在D18S450和D18S474间有一最小共同丢失区;胃癌中SMAD2和DPCA很少发生突变;DCC可通过突变而失活。20q上ZNF217、BTAK和CAS癌基因可能在部分胃癌中发挥作用。
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