螺旋粉虱热激蛋白70和90(HSP70,90)基因Cdna全长克隆及序列分析

来源 :中国昆虫学会2015年学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:radar14015
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  [目的]热激蛋白(HSP)是生物体应对高温或其它环境胁迫时所产生的一类特定的应急蛋白,其表达和调控是生物体对内外环境胁迫条件产生应激反应达到自我保护的重要基础,在不同的热激蛋白家族中,HSP70和90是研究最广泛的2类。螺旋粉虱Aleurodicus dispersus是一种可以危害果树、蔬菜和园林植物等的重要入侵性害虫。前期的生物学生态学研究表明螺旋粉虱对高温有较强的耐受能力,而对低温的耐受能力则较弱。为进一步明确螺旋粉虱对温度胁迫适应性的分子机制,本研究克隆获得了螺旋粉虱HSP70和90基因cDNA全长序列。[方法]利用NCBI数据库中已有的烟粉虱、温室白粉虱等昆虫的HSP70和90基因保守区域,设计合成扩增螺旋粉虱HSP70和90基因中间和两端片段的简并引物,并利用RACE技术扩增其5与3端片段,最终得到螺旋粉虱HSP70和90基因cDNA全长序列。[结果]螺旋粉虱HSP70基因cDNA全长序列为2436 bp,含1956 bp的开放阅读框,编码652个氨基酸,具有真核生物HSP70基因家族的3个明显基序标签,同时在C-末端具有EEVD基序。螺旋粉虱HSP90基因cDNA全长序列为2782 bp,含2166 bp的开放阅读框,编码722个氨基酸,具有真核生物HSP90基因家族的签名序列,同时在C-末端具有EEVD保守氨基酸序列。序列比对和系统发育分析表明螺旋粉虱HSP70和90基因与烟粉虱、温室白粉虱等同翅目昆虫的序列相似度很高,最高可达91%。[结论]HSP70和90基因的克隆和比较分析对于下一步深入研究螺旋粉虱的抗逆机理和温度耐受性等具有重要意义。
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