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目的:研究丹参酮Ⅱ-A磺酸钠(Sodium tanshinoneⅡ-A sulfonate,DS-201)对人肠系膜动脉平滑肌细胞钙激活钾通道(large conductance calcium-activated potassium channels,B&ca)的影响,探讨DS-201在分子水平扩张血管的作用机制.
方法:采用单通道膜片钳及全细胞穿孔膜片钳技术观察人肠系膜动脉平滑肌细胞BKCa。对DS-201的反应性。
结果:在细胞贴附式膜片下(Vm=+40mV),直接加入80μMDS-201,人肠系膜动脉平滑肌细胞BKCa的活性明显增加,BKCa的开放概率由0.012±0.001增至0.039±0.009,平均开放时间由7.340±1.139ms增至15.261±1.290ms,平均关闭时间由1829.3±408.2ms减至267.5±82.3 ms(n=6,P<0.05),电流幅值给药前后无明显变化。在细胞内面向外式膜片下(Vm=+40mV),直接加入80μMDS-201,BKCa的开放概率由0.027±0.008增至0.175±0.084,平均开放时间由19.849±3.139ms增至43.053±3.286ms,平均关闭时间由708.1±408.2ms减至85.607±32.3ms (n=6,P<0.05),电流幅值给药前后无明显变化。但加入10mM EGTA孵育且浴液为绝对无钙时,加入80μMDS-201,BKCa的开放概率,平均开放时间,关闭时间和电流幅值给药前后均无明显变化(n=5, P<0.05)。在全细胞穿孔膜片钳下,在测试的电压范围内,DS-201(80内)对膜电位从-60mV到+30mV时BKCa,电流密度均无明显影响,而在+40mV+50mV和+60mV时BKCa电流密度分别从12.43±3.62pA/pF,17.52±3.78pA/pF和24.14±4.63pA/pF增加到18.67±3.62pA/pF,25.75±2.52pA/pF和34.51±3.76pA/pF (n=4,P<0.05)。
结论:DS-201对人肠系膜动脉平滑肌细胞BKCa的激活需要钙离子的参与。