论文部分内容阅读
目的:通过实验研究观察地龙组分丝氨酸蛋白水解酶对单侧输尿管结扎(UUO)大鼠BMP-7信号转导通路的影响,探讨地龙组分丝氨酸蛋白水解酶延缓肾间质纤维化的机制。 方法:健康雄性wistar大鼠60只,随机分组:假手术组12只,模型组16只,地龙低剂量组16只,地龙高剂量组16只。采用单侧输尿管结扎法复制肾间质纤维化大鼠模型,地龙低剂量组给予地龙组分丝氨酸蛋白水解酶胶囊0.24g/kg·d灌胃;地龙高剂量组给予地龙组分丝氨酸蛋白水解酶胶囊0.48g/kg·d灌胃;假手术组和模型组给予等量蒸馏水灌胃。分别于术后2周、4周处死各组大鼠6只,处死前一天收集24h尿量检测24h尿蛋白定量,处死当天收集血标本用于血清肌酐、尿素氮的检测。取梗阻侧肾组织标本,HE染色后光镜下观察肾脏病理改变;免疫组织化学方法检测肾组织中BMP-7、Smad6、TGF-β1的表达;Western blot检测肾组织中ALK-2、P-Smad5的蛋白表达。 结果:从外观上看,与模型组相比,地龙治疗组在对应时间点上梗阻侧肾脏的肿大及积水程度较轻,色泽较红润。在不同的时间点各组大鼠24小时尿蛋白定量无统计学差异(P>0.05);地龙治疗组大鼠的BUN、Scr水平在第2、4周时均低于模型组(p<0.05或P<0.01),同个时间点,地龙低剂量组大鼠BUN、Scr水平低于地龙高剂量组。HE染色结果显示:随着梗阻时间的延长,模型组及地龙治疗组肾组织开始出现肾间质纤维化,在对应的时间点,地龙治疗组较模型组肾纤维化程度轻。免疫组化结果显示:随着梗阻时间的延长,模型组及地龙治疗组BMP-7、Smad6的表达逐渐减少,TGF-β1的表达逐渐增多;在对应的时间点,地龙治疗组与模型组大鼠相比,BMP-7、Smad6蛋白表达显著增多(p<0.05或p<0.01);地龙高、低剂量组与模型组大鼠相比,TGF-β1的表达显著下降(p<0.05或p<0.01)。Western blot检测结果显示:随着梗阻时间的延长,模型组及地龙治疗组ALK-2、P-Smad5的表达逐渐减少,地龙治疗组ALK-2、P-Smad5的表达明显高于对应时间点模型组(P<0.05),但地龙低剂量组优于高剂量组。 结论:1、地龙组分能够改善UUO大鼠的肾功,降低血肌酐、尿素氮水平。2、地龙组分能够改善UUO大鼠的肾脏病理。3、地龙组分能够上调UUO大鼠肾组织BMP-7、Smad6表达,下调UUO大鼠肾组织TGF-β1的表达。4、地龙组分能够上调UUO大鼠肾组织ALK-2、P-Smad5蛋白水平。5、地龙组分可能通过激活BMP-7信号传导,恢复BMP-7的生物活性,从而抑制肾纤维化的发展。