基于miR-34a调控wnt通路探讨有氧运动抗OJ小鼠肝损伤研究

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目的:采用阻塞性黄疸(OJ)肝损伤KM小鼠为实验研究对象,观察有氧运动对OJ肝损伤小鼠干预作用以及miRNA介导Wnt通路相关因子在肝和血液组织差异表达的比较分析。方法:采用OJ肝损伤小鼠模型,60只雄性KM小鼠随机分为6组:假手术组(SO)、模型组(M)、有氧运动组(TM)、水飞蓟宾组(SFJB)。采用血生化检测血清中总胆红素(TBIL)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和清门冬氨酸氨基转移酶(AST)的水平;HE染色对比小鼠肝脏组织形态及结构的病理改变;免疫组织化学法检测肝脏组织wnt1、β-catenin、cyclinD1的表达以及Ki67细胞计数;荧光定量PCR检测血液和肝组织中wnt1、β-catenin、cyclinD1的表达及相应调控分子miR-34a的差异表达,揭示有氧运动抗肝损伤的作用及可能机制。研究结果:(1)HE染色显示:SO组小鼠肝细胞索呈放射状排列;M组小鼠的肝细胞发生萎缩,肝索断裂,核固缩等间质可见红细胞堆积;SFJB组、TM运动组效果最佳,肝小叶完整,肝索排列整齐,无形变及坏死现象。(2)M组中TBIL、ALT、AST含量最高,TM组、SFJB组含量最低(P<0.01);(3)Real-time PCR结果显示:与M组比较,SFJB组,TM组wnt1、LRP5、β-catenin、cyclinD1、HGFm RNA表达水平显著增加(P<0.05,P<0.01);mi RNA结果显示,与M组比较,TM组、SFJB组的miR-34a水平显著下调,具有统计学差异(P<0.05)。(4)免疫组织化学法结果显示:wnt1、LRP5、β-catenin、cyclinD1、HGF在SO组中低表达,SO组β-catenin、cyclinD1为阴性表达;与M组比较,TM组、SFJB组wnt1、β-catenin、cyclinD1、HGF表达增高(P<0.01)。与M组比较,TM组、SFJB组Ki67阳性表达率明显增加,具有统计学意义(P<0.01)。结论:中等强度有氧运动对OJ小鼠引发的肝损伤有明显缓解作用,能不同程度促进肝细胞修复,其抗损伤作用与SFJB组作用相近。其作用机制与运动通过miR-34a介导激活Wnt信号通路发挥着关键性的作用有关。RNA在血浆中的表达水平作为一种无创的、简单易行的检测手段,为肝脏疾病的诊断及发生发展过程中标志物的筛选具有良好的应用前景。
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