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研究目的:骨桥蛋白(Osteopontion,OPN)属于小整合素结合配体N-连接糖蛋白,广泛的分布于多种组织和细胞中,能够参与组织修复,自身代谢等功能。近年研究证实OPN在肿瘤发生、发展各个阶段以及增殖、侵袭和转移等生物学行为中都有重要作用,被认为是一种肿瘤标志物。头颈部癌(Hand Neck Cancer,HNC)是常见恶性肿瘤,包括起源于鼻窦、鼻腔、口腔、咽、喉等部位的上皮性恶性肿瘤,全球每年新发病约50万,占性恶性肿瘤6%,病理类型几乎为鳞癌。p38MAPK信号转导通路是MAPK通路分支之一,通过转录因子磷酸化而改变基因表达水平,参与多种胞内信息传递,能对广泛细胞外刺激发生反应。为明确头颈部鳞癌(HNSCC)中OPN的表达及作用,本研究利用临床头颈部鳞状细胞癌样本及头颈部鳞癌细胞系,检测OPN表达差异,分析OPN与头颈部鳞癌细胞增殖、侵袭的关系,并分析参与调控细胞增殖的信号通路。实验方法:利用Real-time PCR及Western-blot检测临床样本头颈部鳞癌组织及相邻癌旁组织OPN表达情况。选取口腔鳞癌细胞(UM-SCC6)及鼻咽癌细胞(CNE-2),以OPN-siR NA、Over-OPN分别下调和上调OPN的表达,通过CCK8实验和克隆形成实验检测OPN对细胞增殖的影响;通过Transwell实验检测OPN对细胞侵袭的影响,Western-blot实验检测侵袭相关标志因子MMP2、MMP9表达情况。将UM-SCC6及CNE-2分为空白组及p38抑制剂组(SB203580),每组分为Mock亚组、OPN-siRNA亚组、Over-OPN亚组,采用Western-blot检测p38及p-p38表达情况,并通过免疫荧光实验检测各组p38、p-p38核内外表达情况。实验结果:Western-blot及Real-time PCR实验结果显示头颈部鳞癌组织中的OPN表达高于癌旁组织,结果有统计学差异。在UM-SCC6细胞及CNE-2细胞中转染Over-OPN载体,CCK8实验、克隆形成实验及Transwell实验结果显示,与对照组相比Over-OPN组增殖及侵袭能力显著提高,Western-blot结果显示OPN-over组MMP2及MMP9表达升高;在UM-SCC6细胞及CNE-2细胞中转染OPN-siR NA,CCK8实验、克隆形成实验及Transwell实验结果显示,与对照组相比OPN-siRNA组增殖及侵袭能力显著降低,Western-blot结果显示OPN-siRNA组MMP2及MMP9表达降低。在加入p-38抑制剂(SB203580)后,Western-blot结果显示,与空白组相比,OPN-siRNA亚组、SB203580亚组、OPN-siRNA+SB203580亚组p-p38表达降低;Over-OPN亚组p-p38表达升高;细胞免疫荧光结果显示,与空白组相比,OPN-siRNA亚组、SB203580亚组、OPN-siRNA+SB203580亚组细胞核内p-p38表达降低,Over-OPN亚组细胞核内p-p38表达升高。实验结论:OPN在头颈部鳞癌中表达水平升高,上调OPN的表达能够促进头颈部鳞癌细胞(UM-SCC6、CNE-2)的增殖及侵袭,下调OPN的表达能够抑制头颈部鳞癌细胞(UM-SCC6、CNE-2)的增殖及侵袭。OPN可能是通过激活p38信号通路调控不同HNSCC细胞系的增殖、侵袭能力。