【摘 要】
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以核桃幼嫩叶片为材料,针对核桃体内富含酚类、多糖等次生物质,采用改良的CTAB法,提取其基因组DNA,经1.0％琼脂糖凝胶电泳检测,蛋白、多糖、RNA 等去除较干净,适用于分子标记及其分子生物学的研究.采用正交试验设计,对影响薄壳山核桃ISSR-PCR反应体系的主要因子：Taq 酶、dNTP、引物、模版DNA的浓度进行了优化,并得到了适合薄壳山核桃的ISSR-PCR 反应体系：25uL 的反应体系
【机 构】
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南京林业大学森林资源与环境学院,江苏南京 210037 南京绿宙薄壳山核桃科技有限公司,江苏南京
【出 处】
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中国林学会经济林分会2012年学术年会
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以核桃幼嫩叶片为材料,针对核桃体内富含酚类、多糖等次生物质,采用改良的CTAB法,提取其基因组DNA,经1.0％琼脂糖凝胶电泳检测,蛋白、多糖、RNA 等去除较干净,适用于分子标记及其分子生物学的研究.采用正交试验设计,对影响薄壳山核桃ISSR-PCR反应体系的主要因子：Taq 酶、dNTP、引物、模版DNA的浓度进行了优化,并得到了适合薄壳山核桃的ISSR-PCR 反应体系：25uL 的反应体系中(含2.5uL 10×PCR Buffer(+Mg2+)),Taq DNA聚合酶0.625U,dNTP 0.4 mmol/L,引物0.8 μmol/L,模版DNA40 ng.
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