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以固定化蛋白质为核心的亲和色谱法在功能蛋白质与药物相互作用研究方面已具有广泛应用,但仍具有药物用量大、分析时间长和色谱峰展宽严重等不足.本研究以内皮素受体A(ETA)为对象,采用基因工程技术将表皮生长因子受体(EGFR)的酪氨酸激酶活性肽段重组至ETA碳末端,肿瘤细胞系中表达获得大量重组受体.由于EGFR的酪氨酸激酶活性肽段中半胱氨酸797可与其共价抑制剂依鲁替尼的丙烯酰胺中的烯键发生迈克尔加成反应,反应迅速且条件温和.