SREBP-1c激活大鼠PNPLA3基因转录

来源 :2013年广东省医学会内分泌学/糖尿病学学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:young1592
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  目的 探讨大鼠Patatin样磷酯酶结构域蛋白3(PNPLA3)是否受固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP-1c)直接调控.材料与方法 从大鼠全血基因组中克隆出3段首尾相接的PNPLA3启动子片段(R-PNPLA3-1、R-PNPLA3-2、R-PNPLA3-3)并重组进荧光素酶报告载体PGL3-Basic.分别将此3段启动子载体转染进正常人肝细胞株L02细胞,进一步将pcDNA3.1-SREBP-1c表达质粒分别与3段PNPLA3启动子载体共转染L02细胞,培养24小时后检测细胞裂解液中荧光素酶活性.结果(1)通过酶切鉴定及测序证明扩增的3段大鼠PNPLA3启动子片段成功插入载体质粒中;(2)L02细胞转染R-PNPLA3-1后荧光素酶活性升高51.13倍(P<0.01),转染R-PNPLA3-2和R-PNPLA3-3则无明显变化;(2)LO2细胞共转染R-PNPLA3-1+pcDNA3.1-SREBP-1c组荧光素酶升高2.63倍(P<0.05),R-PNPLA3-2+pcDNA3.1-SREBP-1c组和R-PNPLA3-2+pcDNA3.1-SREBP-1c组无明显变化.结论 R-PNPLA3-1启动子片段包含SREBP-1c的结合位点,SREBP-1c可通过结合到大鼠PNPLA3启动子区的结合位点上直接激活PNPLA3基因转录.
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