【摘 要】
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黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)是葫芦科上的重要病毒之一,严重为害葫芦科作物,威胁产业发展.近几年我国嫁接西瓜由于带毒砧木种子的滥用,该病毒曾在不同省份暴发.本实验室根据已有CGMMV-hn分离物的序列,将其基因组分成两段扩增,依次插入植物表达载体pXT1中,从而获得CGMMV全长克隆pXT1-CGMMV.为了验证该克隆的侵染性
【机 构】
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中国农业科学院郑州果树研究所,河南省果树瓜类生物学重点实验室,郑州450009
【出 处】
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中国植物病理学会第十二届青年学术研讨会
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黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)是葫芦科上的重要病毒之一,严重为害葫芦科作物,威胁产业发展.近几年我国嫁接西瓜由于带毒砧木种子的滥用,该病毒曾在不同省份暴发.本实验室根据已有CGMMV-hn分离物的序列,将其基因组分成两段扩增,依次插入植物表达载体pXT1中,从而获得CGMMV全长克隆pXT1-CGMMV.为了验证该克隆的侵染性,采用农杆菌注射法接种本生烟、西瓜、甜瓜和瓠瓜,2～3周后植株相继产生典型的花叶、斑驳症状,经ELISA和RT-PCR检测,发病植株均为阳性.之后将发病的叶片经摩擦接种回接到健康的西瓜、甜瓜、本生烟植株上,植株均能发病,说明构建的侵染性克隆具有强致病性,可以用于突变体的筛选、病毒与寄主互作等相关的研究.本实验室应用pXT1-CGMMV,对复制酶区域进行了突变检测,以期了解该区域与病毒致病性的关系.利用定点突变技术共获得49个突变体,ELISA检测显示21个突变体为阳性,但部分突变体在植株体内病毒含量较低或不造成明显症状或使植株发病明显延迟.症状形成的分子决定簇正进一步分析中.
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