【摘 要】
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目的:雪旺细胞是神经组织再生工程领域具有前景的种子细胞,然而其应用受到了体外培养条件下生物学活性减弱和功能降低的限制.因此,寻找一种可以提高体外培养条件下雪旺细胞活性和生物学功能的途径尤为重要.方法:使用超顺磁性氧化铁纳米微粒和壳聚糖-β甘油磷酸钠聚合物合成磁性材料,利用振动样品磁强计检测材料磁性,傅里叶红外光谱仪和X射线衍射仪检测材料组成和稳定性;流式细胞术检测磁场强度对雪旺细胞的影响,CCK-
【机 构】
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第四军医大学西京医院骨科 陕西西安710032中国 第二军医大学长海医院骨科 上海200433中国
【出 处】
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首届全国组织修复与再生医学大会暨国际组织修复与再生医学学术研讨会
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目的:雪旺细胞是神经组织再生工程领域具有前景的种子细胞,然而其应用受到了体外培养条件下生物学活性减弱和功能降低的限制.因此,寻找一种可以提高体外培养条件下雪旺细胞活性和生物学功能的途径尤为重要.方法:使用超顺磁性氧化铁纳米微粒和壳聚糖-β甘油磷酸钠聚合物合成磁性材料,利用振动样品磁强计检测材料磁性,傅里叶红外光谱仪和X射线衍射仪检测材料组成和稳定性;流式细胞术检测磁场强度对雪旺细胞的影响,CCK-8细胞活性实验检测磁场作用时间对雪旺细胞的影响,EdU细胞增殖实验、Prestoblue细胞活性实验和Live/Dead活死细胞染色实验分别检测雪旺细胞在磁性膜和磁性支架上的活性和增殖情况.RT-PCR和Elisa实验分别检测神经营养因子BDNF、GDNF、NT-3和VEGF的表达与分泌.结果:含有10%磁性纳米微粒的磁性材料,其横截面直径为32.33±1.81 ?m,孔隙率为80.41%±0.72%,磁性为5.691emu/g(在8 kOe下);2 mT,50Hz,2h的磁场为最适磁场参数.含有10%超顺磁性氧化铁纳米微粒的磁性纳米材料能够支持雪旺细胞的粘附与伸展,并在最适磁场参数作用下进一步促进雪旺细胞的活性和增殖.更有趣的是,磁性支架与磁场联合能够显著促进神经营养因子BDNF、GDNF、NT-3和VEGF的表达与分泌.结论:该磁性纳米材料联合磁场可以精确调节雪旺细胞的活性和生物学功能,为进一步联合应用生长因子等开发新型神经组织再生工程材料奠定了基础.结论:该MECM制备方法能够较好地保留天然半月板组织的ECM成分,去除细胞DNA物质.兔MFC在单层扩增培养的条件下发生了去分化的现象.MECM可以同时促进传代去分化MFC (P3)的细胞增殖以及再分化,因此MECM可能是未来组织工程(Tissue Engineering,TE)半月板支架材料中相当有应用前景的生物材料之一.
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