【摘 要】
：
目的 构建大鼠离子通道相关蛋白(FXYD5)基因真核表达载体,研究其对大鼠肾小管上皮细胞的体外作用.方法 以含FXYD5全长cDNA的pBluescript Ⅱ KS(+/-)载体为模板,并用PCR方
【机 构】
：
温州医学院附属第一医院心内科 325000 温州医学院心血管生物和基因研究所
【出 处】
：
第五届钱江国际心血管病会议暨2011浙江省心血管病年会
论文部分内容阅读
目的 构建大鼠离子通道相关蛋白(FXYD5)基因真核表达载体,研究其对大鼠肾小管上皮细胞的体外作用.方法 以含FXYD5全长cDNA的pBluescript Ⅱ KS(+/-)载体为模板,并用PCR方法扩增,将其连接于真核表达质粒pcDNA3.1(+),PCR、双酶切和测序鉴定后,用脂质体包裹转染大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E),转染重组真核表达载体为实验组(PF组),转染空质粒PCDNA3.1(+)为阴性对照组(NC组)和未做处理的为空白对照组(BC组).通过半定量RT-PCR和real-time PCR定量检测FXYD5的表达水平.并研究该基因对肾小管上皮细胞膜Na+-K+-ATPase活性、细胞增殖能力的影响.结果 RT-PCR、双酶切和测序证明,重组的真核表达载体pcDNA3.1(+)-FXYD5构建成功,PF组FXYD5的表达水平跟BC组相比上调9.645倍,PF组的细胞膜Na+-K+-ATPase活性高于BC组和NC组(P＜0.05)、细胞增殖能力高于NC组(P＜0.05),但与BC组无统计学差异.结论 成功构建了真核表达载体pcDNA3.1(+)-FXYD5,并在NRK-52E细胞中使FXYD5基因的表达水平增加,且增强NRK-52E细胞膜的Na+-K+-ATPase活性和细胞增殖能力.初步对FXYD5基因的功能做了研究,从而推断FXYD5很有可能是高血压病新的致病基因之一.
其他文献
甲醇制烯烃工艺技术生产以乙烯、丙烯为主的低碳烯烃,同时具有低碳烯烃收率高、甲醇消耗低的特点,是近十年成熟起来的新型化工生产工艺.南京诚志清洁能源有限公司的甲醇制烯
目的 构建大鼠Pax-8基因全长序列的真核表达载体pcDNA3.1,并将重组质粒转染至心肌细胞系H9C2中进行表达,测定转染后Pax-8基因对心肌细胞增殖及凋亡的影响.方法 酶切pCMV
采用铁炭微电解-Fenton试剂处理制药废水.设计处理水量:物化预处理2m3·h-1、生化处rn理3m3·h-1.运行结果表明,该工艺处理效果良好,出水pH6～9,COD≤500mg·L-1,SS≤400 mg·L
为提高减压塔塔顶真空度,采用先进的抽真空成套设备替代原有抽真空系统的设施,并对工艺流程进行优化改造.实施后减压塔真空度提高4.5 kPa,减压蜡油拔出率提高5.81％,减炉出口温
Background Hyperhomcysteine was found to be an independent risk factor of coronary heart disease.But whether it really influenced the progression of atheros
请下载后查看，本文暂不支持在线获取查看简介。
Please download to view, this article does not support online access to view profile.
摘要：20世纪80年代，随着奥运会的蓬勃兴起，体育就被逐渐重视起来，关注孩子健康成为体育教学的重点。体育运动促进了学生的身体、心理健康。对初中体育教学而言，体育游戏的存在显得尤为重要，它逐渐成为体育教学中的新宠，对孩子的成长有着极其重要的作用。就初中体育教学中体育游戏的特点、作用及存在的问题进行了详细分析，以期提高体育教学的效果。 关键词：初中体育：游戏：注意的问题 孩子的天性就是多动，中学生
食用菌生产中,种植户常需外购原种或栽培种,但由于缺乏鉴别菌种质量的技术,所以生产中经常会出现因菌种质量问题而引发的大感染,菇体质量差、产量低等一系列问题。所以,菌种