四妙勇安汤含药血清对巨噬细胞泡沫化自噬相关因子Atg5、beclin1、p62表达的影响

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背景:四妙勇安汤是传统的清热解毒方剂,具有清热解毒、活血通脉之功。现代药理研究已证实四妙勇安汤具有抗动脉粥样硬化的作用,但作用机制尚未阐明。目的 :考察四妙勇安汤含药血清对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞自噬相关因子Atg5、beclin1、p62的影响,初步探讨其抗动脉粥样硬化的作用机制。方法 :采用ox-LDL诱导小鼠RAW264.7巨噬细胞构建泡沫细胞模型,制备不同剂量浓度的四妙勇安汤含药血清,并将其作用于泡沫细胞。采用油红O染色法观察巨噬细胞泡沫化程度;荧光定量PCR法检测细胞Atg5、beclin1的mRNA表达;Western Blot法检测细胞Atg5、beclin1、p62的蛋白表达情况。结果 :镜下油红O染色显示ox-LDL诱导的巨噬细胞内红色脂滴明显,呈现出典型的泡沫细胞形态;与正常血清对照组相比,模型组用ox-LDL刺激RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞后,诱导了Atg5、beclin1 mRNA及蛋白的表达,抑制了p62蛋白的表达(P <0.05);与模型组相比,四妙勇安汤含药血清干预后能进一步上调ox-LDL诱导的巨噬细胞源性泡沫细胞Atg5、beclin1 mRNA及蛋白的表达水平(P <0.05),下调p62蛋白的表达水平(P <0.05)。结论:四妙勇安汤含药血清可诱导泡沫化的巨噬细胞自噬相关因子Atg5、beclin1的表达、抑制p62的表达,促进泡沫化的巨噬细胞自噬,这可能是其防治动脉粥样硬化的作用机制之一。
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