目的：探讨抗菌肽nisin联合常用抗生素对三种粪肠球菌的抗菌活性和抗生物膜活性。方法：通过MIC和MBC测定检测抗菌肽nisin能否提高常用抗生素对粪肠球菌的抑菌作用；采用Checkerboard方法分析nisin和青霉素或氯霉素的协同抗菌效应；利用透射电镜观察青霉素或氯霉素与nisin联合应用时对粪肠球菌破坏程度；激光共聚焦显微镜观察nisin对青霉素、环丙沙星或氯霉素对粪肠球菌抗生物膜活性影响。结果：200 U/ml nisin显著提高15种抗生素对粪肠球菌抗菌活性；nisin和青霉素或氯霉素具有协同性效应；青霉素和氯霉素联合nisin对粪肠球菌破坏显著；nisin可明显提高青霉素、环丙沙星和氯霉素对生物膜内粪肠球菌杀灭作用。结论：抗菌肽nisin显著提高多种抗生素的抗菌和抗生物膜活性，抗生素联合nisin对抑制粪肠球菌耐药性具有应用前景。