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链置换扩增技术(SDA)是一种基于链置换反应的等温扩增技术,具有操作简单,条件容易控制的优点,被广泛应用于荧光标记的DNA检测.本文对链置换扩增的模板进行改进,成功将此技术与电致化学发光检测方法结合起来,构建了一种简单而灵敏的电化学发光传感器用于microRNA的检测。叔胺>仲胺>伯胺。本文尝试将三(2-氨基乙基)胺(TAEA)与羧基联吡啶钌交联，以达到将共反应基团叔胺引入发光试剂分子内部，极大增强电子转移效率，增强电致化学发光信号，以此合成一种自增强的联吡啶钌衍生物。C60具有良好的光学性质，良好的成膜性，同时，多不饱和结构，也提供了一种信号放大的可能方式。根据扩增目标的序列，设计一条含有与目标链互补序列，切口酶剪切识别位点，引物的互补序列，并将以上序列合理排列的模板链，采用切口酶以及带有链置换活性的DNA聚合酶，在适宜的条件下，进行链聚合，剪切，链置换的循环，以实现目标DNA扩增的目的。本文为了能将链置换扩增技术更好的移植到电化学方法中，采用了一条双链的模板，最后将microRNA检测转变为扩增目标链的检测。相比单链模板，本方法解决了目标链与模板杂交影响检测的问题，同时将DNA扩增过程与检测过程分离，实现模块化操作过程，极大地降低了RNA实验条件控制对最终检测精度的影响。所制备的传感器在pH=7.4的PBS中检测，对microRNA的浓度变化的响应在1fM-1pM范围内表现出良好的线性。