【摘 要】
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Lonsdalea引起的欧美杨细菌性溃疡病(Lonsdalea quercina)是我国杨树枝杆上一种新发现的毁灭性生物灾害,成为杨树发展的巨大威胁.据初步调查,该病害已在菏泽及周边的杨树
【机 构】
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山东农业大学植物保护学院/山东省林业有害生物防控工程技术研究中心/山东省农业微生物重点实验室,山东 泰安 271018
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Lonsdalea引起的欧美杨细菌性溃疡病(Lonsdalea quercina)是我国杨树枝杆上一种新发现的毁灭性生物灾害,成为杨树发展的巨大威胁.据初步调查,该病害已在菏泽及周边的杨树栽培区普遍发生,分布在菏泽市的九个县区(牡丹区、曹县、定陶县、成武县、单县、巨野县、郓城县、鄄城县、东明县),以及周边的济宁市、河南省濮阳市、开封市等.发病多集中在丰产林,林网、四旁树也存在不同程度的发生.2-20年生的幼苗、幼林和成林均可发病,被危害的树木在茎干上引起树皮开裂、并从开裂处流出大量汁液,引起树干韧皮部局部坏死、皮层腐烂,导致生长衰弱,树干畸形,木材变色,溃烂严重时可造成树干风折,甚至全株死亡,严重影响杨树的生长和成材,造成重大经济损失,因此,筛选快速、特异和有效的病害诊断和早期检测技术,对于减少病害的危害十分重要和关键. 本研究采用的酶联免疫吸附法(Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay,ELISA)是以免疫学原理为基础,通过双抗夹心法对杨树细菌性溃疡菌进行特异性检测.用杨树溃疡菌作为抗原通过新西兰兔进行免疫原注射制造特异性抗体,作为一抗;HRP标记的山羊抗兔抗体作为二抗.一抗先与包被原反应,再加入二抗与二抗反应,最后加入底物反应产生颜色,待反应结束加入终止液,测量OD值,根据颜色深浅或根据OD值的大小来判断抗原抗体反应的量的大小,在试验中通过控制包被原以及一抗的浓度对一抗的灵敏度进行效价,找出了一抗的最佳检测浓度和检测时间,建立了ELISA快速检测体系.该体系可以快速,灵敏的对杨树细菌性溃疡病菌进行检测.
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