【摘 要】
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<正> 目的分离骨髓源原始干细胞,并检测其多能性。方法用CD45、GlyA及CD34免疫磁珠阴性选择Ficoll-Paque分离液梯度分离得到低密度胎儿骨髓源单个核细胞后,通过极限稀释法获
【机 构】
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中国医学科学院中国协和医科大学组织工程中心实验血液学国家重点实验室;
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<正> 目的分离骨髓源原始干细胞,并检测其多能性。方法用CD45、GlyA及CD34免疫磁珠阴性选择Ficoll-Paque分离液梯度分离得到低密度胎儿骨髓源单个核细胞后,通过极限稀释法获得单克隆细胞,体外扩增并鉴定其生物学特性:（1）GlyA-CD34-细胞的分离和培养:取引产胎儿骨髓,用Ficoll-Paque（1.077g/ml）分离液分离单个核细胞,1200rpm离心20min后,取白环以上的细胞,1000rpm离心10min。将离心后的细胞打散并以1×107个/ml细胞接种在fibronectin包被的25cm2的培养瓶内,细胞扩增培养液成分为:40%MCDB,55%DF12,5%胎牛血清,100u/ml青霉素和1000u/ml链霉素。在含5%的CO2,37℃培养箱内孵育。第三天去掉悬浮细胞,而贴壁细胞继续培养6天左右。细胞融合约达60%时,用
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