【摘 要】
：
随着对GAG研究的深入，已发现其在抗癌、提高免疫、降血脂、抗氧化作用、抗血栓、抗凝血等方面呈现出较强的活性。研究了用高效液相色谱电喷雾质谱联用技术测定花蛤中肝素的方法.花蛤(去壳),捣碎成匀浆,加入NaCl粉末进行超声波处理辅助盐析提取.将粗提取物经水解、纯化后,再进色谱柱测定.高效液相色谱条件ACQUITY UPLC BEH Amide(2.1mm×100mm,1.7μm);保护柱ACQUITY
论文部分内容阅读
随着对GAG研究的深入，已发现其在抗癌、提高免疫、降血脂、抗氧化作用、抗血栓、抗凝血等方面呈现出较强的活性。研究了用高效液相色谱电喷雾质谱联用技术测定花蛤中肝素的方法.花蛤(去壳),捣碎成匀浆,加入NaCl粉末进行超声波处理辅助盐析提取.将粗提取物经水解、纯化后,再进色谱柱测定.高效液相色谱条件ACQUITY UPLC BEH Amide(2.1mm×100mm,1.7μm);保护柱ACQUITY UPLCBEH Amide VanGuard(2.1mm×5mm,1.7μm);流动相水-甲醇(0.2％冰醋酸)80∶20;流速0.2mL/min;进样10μL.结果表明,该方法下肝素在25～400mg/L范围内峰面积和浓度呈良好的线性关系,相关系数R2=0.9992;肝素的平均回收率为102.77％.此方法可快速检测花蛤中肝素组分.
其他文献
蛋白质的磷酸化修饰是生物体内重要的共价修饰方式之一,在生命活动中具有重要的调控作用.对磷酸化蛋白质的分析是蛋白质磷酸化研究非常关键的第一步,也是当前蛋白质组学研究的重要内容之一.由于细胞/组织内磷酸化蛋白质的含量非常少,以及在质谱分析时,非磷酸化肽段对磷酸化肽存在信号抑制作用,使得磷酸化蛋白质或磷酸化肽段的检测非常困难.对目标磷酸化肽段进行选择性富集,不仅可以增加可检测的磷酸化肽的绝对量,还能消除
合成寡聚核苷酸在基因的分离、诊断，疾病的诊断和治疗，以及PCR扩增和DNA测序等许多领域内有广泛的应用.反义寡核苷酸(antisenseoligodeoxynucleotideASODN)是一类以mRNA/vRNA为作用靶,通过碱基配对原则与DNA或RNA结合,并特异性阻断基因表达和病毒复制的人工合成DNA片段.由于ASODN及其类似物具有作用特异性,是治疗病毒性传染病和肿瘤的一类潜在新型药物。
蛋白质磷酸化作用是通过对蛋白质上的氨基酸进行磷酸盐的酯化作用来改变蛋白质的构象,进而影响蛋白的活性和稳定性.蛋白磷酸化的作用与功能研究日渐成为细胞生物学和生物医药科学的焦点.它在以蛋白质为基础的生命过程中起着关键的调节作用.这些过程包括:细胞的分化和繁殖、基因表达以及一系列的代谢过程.在真核细胞中,最典型的磷酸化作用的接受体为含羟基的氨基酸,而常见的含羟基的氨基酸主要有丝氨酸(Ser)、酪氨酸(T
疏水性在药物的吸收,血浆蛋白的结合,药物-受体相互作用以及药代动力学中都是需要考虑的重要物化性质,因此对疏水性的定量描述是非常重要的.由于疏水效应与溶剂分配现象有关,所以在定量构效关系研究中,常用有机化合物的醇-水分配系数(log P)作为其疏水性的衡量参数.随着现代新药的迅速发展,能够简单、快速的预测药物的log P,对药物的设计和开发具有特殊的意义,所以一直是该领域研究的热点之一。
IAM(Immobilized Artificial Membrane)由于具有与细胞膜结构的相似结构,作为色谱填料时可固载膜蛋白作为固定相,模拟细胞膜表面情况,用于膜蛋白功能研究,如受体-配体相互作用、药物分子的抑制剂与激动剂的选择等方面.如何有效地将细胞膜蛋白固载在IAM颗粒上并保持生物活性成为实现这一新技术的关键之处.蛋白质结构性质复杂,易受各种条件影响,如温度、pH和离子强度等.为摸索膜蛋
一般一次分离过程只能进一次样.但在蛋白质的梯度洗脱色谱中,一次分离中可多次进样,蛋白质的保留时间及峰形无可觉察的变化.这种进样法可以叫累加进样法.累加进样法在提高蛋白质和生物大分子的分析灵敏度、提高柱子的处理量、节省溶剂和提高分离制备效率方面有十分明显的效果和广泛的应用前景.本文研究，1.蛋白质洗脱曲线有明显的突跃区，2.蛋白质在累加进样分离中保留值和峰形无可觉察的变化，3.选择性保留累加进样分离
D-天冬氨酸(D-Asp)和D-谷氨酸(D-Glu)是存在于生物体内的两种重要的D-氨基酸.已有研究表明,两者的含量,在肿瘤蛋白和正常组织蛋白之间,存在显著差异.因此,建立快速、准确测定D-Asp和D-Glu含量的方法,对于D-氨基酸的生理学和临床医学研究具有重要意义.最近我们设计组装了一套毛细管电泳光导纤维发光二极管(LED)诱导荧光检测装置.该装置以非常便宜的LED作为激发光源,用光导纤维将光
由于在临床上显示了巨大的应用价值,多肽类药物受到药物化学家越来越多的重视,其研究和开发成为国际新药技术领域竞争中的重要方面.但固相合成的多肽往往由于复杂的体系和各种副反应使得合成多肽纯度较低.高效液相色谱技术是生物技术中分离纯化的重要方法,在多肽、蛋白质的分离纯化工艺中显示出优异的性能.本文利用反相制备型高效液相色谱系统对合成的新型多肽药物-机体保护肽粗品进行了分离纯化及制备技术的研究。
蛋白质间的相互作用在生物过程中占有极其重要的地位.研究蛋白质间相互作用的方法有很多,但各有其优缺点.生物功能化色谱(biofunctional chromatography,简称BFC)方法是发展出的在色谱体系下模拟出生物膜表面的环境进行膜上生物分子间相互作用研究的方法,不仅可以研究蛋白间的相互作用,还可以进行药物吸收、药物筛选等一系列工作.转铁蛋白(transferrin,简称TF)是一种重要的
加压毛细管电色谱(Pressurized capillary electrochromatography,pCEC)将液相色谱与毛细管电泳巧妙结合,是一种高效的微柱分离技术.它在毛细管中填充液相色谱固定相,依靠电渗流和液压共同驱动流动相,使中性和带电荷的样品分子根据他们吸附、分配平衡常数和电泳速率的不同而达到分离分析的电动色谱分离模式.本文研究加压毛细管电色谱在微量生物样品分离中的应用。