在线变性-酶解-反相色谱分离-质谱鉴定系统的构建

来源 :第十七届全国色谱学术报告会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhegeyonghukeyi
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样品预处理技术是蛋白质分析的关键环节。通常蛋白质样品的前处理涉及多个实验步骤,包括蛋白质的变性、还原、烷基化、酶解及脱盐等。这些操作常以离线方式进行,不仅需要较长的处理时间(>12 h),而且也可能造成样品的损失和污染。本文设计了一个简便的蛋白质的高通量分析系统。蛋白质经在线加热器热变性后进入固定化酶反应器进行酶解,并用反相色谱分离-质谱联用系统进行酶解产物的分离分析。利用该系统,可将蛋白质样品的在线处理时间缩短为3.5分钟。有效避免了手动操作和样品损失,增加了蛋白质样品分析的通量和准确性。
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