【摘 要】
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目的:采用RBL-2H3细胞模型对临床常用的清开灵、血塞通中药注射剂类过敏反应进行初步评价,并通过动物整体实验,进一步考察该细胞用于中药注射剂类过敏评价中的可行性。方法:
【机 构】
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上海中医药大学药物安全评价研究中心;
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目的:采用RBL-2H3细胞模型对临床常用的清开灵、血塞通中药注射剂类过敏反应进行初步评价,并通过动物整体实验,进一步考察该细胞用于中药注射剂类过敏评价中的可行性。方法:采用MTT法测定清开灵、血塞通注射剂对RBL-2H3细胞生长的IC10、IC50、IC80。用不同浓度的清开灵或血塞通注射剂、阳性药对照C48/80或等体积培养液(空白对照)刺激RBL-2H3细胞,每组设3个复孔,荧光法检测上清液中组胺释放率,酶促法检测β-氨基己糖苷酶释放率。另弃上清,取药物刺激后的RBL--2H3细胞,显微镜镜下计算细胞脱颗粒率情况,电镜观察脱颗粒细胞形态及超微结构变化。取ICR小鼠分为清开灵高、中、低剂量组,血塞通高、中、低剂量组,空白对照组,C48/80阳性对照组进行类过敏试验,分别以含0.4%的伊文思蓝的不同浓度的药物或等体积生理盐水进行单次尾静脉注射,记录给药30min后出现耳廓蓝染的动物数、蓝染总耳数及耳廓伊文思蓝渗出量。结果:细胞实验显示,清开灵注射剂的IC80、IC50、IC10分别为50、12.5、1.56μL/mL;血塞通注射剂IC80、IC50、IC10分别为33.3、12.5、3.33μL/mL。两种注射剂在较高浓度时均能促进细胞释放组胺和β-氨基己糖苷酶(P<0.05或P<0.01),并呈一定的剂量依赖性。细胞形态上显示细胞表面绒毛减少,细胞内部空泡状结构增加。小鼠类过敏试验显示,两种注射剂对动物耳蓝染率均为100%、伊文思蓝渗出量明显增多(P<0.01)。离体与整体试验结果一致。结论:清开灵、血塞通注射剂均具有直接刺激RBL-2H3细胞脱颗粒作用,且均能使小鼠耳廓出现明显蓝染,表明清开灵、血塞通注射剂具有潜在致类过敏反应性,同时提示RBL-2H3细胞在评价类过敏研究中具有一定的参考应用价值。
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