【摘 要】
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采用高通量胶内差异双向电泳技术(2D DIGE)研究角质形成细胞HaCaT受中波紫外线(UVB)处理前后其蛋白质表达谱的变化；通过高效液相色谱-电喷雾串联质谱技术(HPLC-nESI-MS/MS)鉴定差异表达蛋白,筛选UVB影响皮肤细胞正常生理功能的靶标蛋白.采用UVB(21±1 mj/cm2)照射HaCaT细胞18h,再在正常细胞培养条件下孵育6h,然后抽提蛋白质；采用Cy2、Cy3和Cy5荧光
【机 构】
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大连医科大学生物化学与分子生物学教研室 大连医科大学生物技术系 大连116044
【出 处】
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泛环渤海地区(七省二市)生物化学与分子生物学会2010年学术交流会
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采用高通量胶内差异双向电泳技术(2D DIGE)研究角质形成细胞HaCaT受中波紫外线(UVB)处理前后其蛋白质表达谱的变化；通过高效液相色谱-电喷雾串联质谱技术(HPLC-nESI-MS/MS)鉴定差异表达蛋白,筛选UVB影响皮肤细胞正常生理功能的靶标蛋白.采用UVB(21±1 mj/cm2)照射HaCaT细胞18h,再在正常细胞培养条件下孵育6h,然后抽提蛋白质；采用Cy2、Cy3和Cy5荧光染料标记蛋白,进行2D DIGE,每组样品样本数为3.使用蛋白荧光染料Deep Purple对凝胶经进行后染色(post-stain).使用DeCyder软件分析对照组与UVB处理组间的差异表达蛋白斑点,差异表达在2D DIGE检测限以上的蛋白斑点有41个.
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