【摘 要】
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目的：构建TREM-1基因RNAi慢病毒载体,探讨TREM-1在脆弱类杆菌所致炎症反应中的作用.方法：根据小鼠TREM-1的mRNA序列选择4个靶序列并设计合成4对双链DNA oligo,其两端含酶切
【机 构】
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中南大学湘雅医院 烧伤整形科410008
【出 处】
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中华医学会烧伤外科学分会2009年学术年会
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目的：构建TREM-1基因RNAi慢病毒载体,探讨TREM-1在脆弱类杆菌所致炎症反应中的作用.方法：根据小鼠TREM-1的mRNA序列选择4个靶序列并设计合成4对双链DNA oligo,其两端含酶切位点粘端,同时合成1对阴性对照双链DNA oligo；将以上5对双链DNA oligo退火后连入pGCSIL-GFP载体,PCR和测序鉴定后,将以上质粒分别和包装质粒混合物共转染293T细胞,包装产生病毒颗粒.各组病毒载体转染Raw264.7细胞后,运用Real-Time PCR和ELISA检测TREM-1 mRNA和蛋白表达水平.实时定量PCR、ELISA观察干扰TREM-1后脆弱杆菌内毒素引发的Raw264.7细胞内毒素血症模型中TREM-1的表达变化.
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