基因芯片法对苏州市结核临床分离株INH耐药性快速检测价值的研究

来源 :中华医学会结核病分会2013年学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wuln2909
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目的:评价基因芯片法检测INH耐药结核分离株的临床价值,为利用该法快速鉴别苏州市结核INH耐药菌株的可靠性奠定基础. 方法: 从苏州大学附属传染病医院肺结核科就诊的患者收集痰液标本,罗氏固体培养法(金标准)对结核分枝杆菌进行传统药敏试验;根据药敏试验结果随机抽取INH耐药和敏感菌株各21例,利用品芯(@)结核分枝杆菌耐药检测试剂盒及相关仪器通过核酸提取、PCR扩增、芯片杂交和芯片扫描,分别对结核分枝杆菌INH耐药相关基因KatG 315、inhA-15位点进行检测,将获得的INH药敏判读结果与金标准法进行比较分析;从经基因芯片检测过的菌株中随机抽取18例,用PCR法扩增包含315位点在内的KatG基因片段,经纯化后进行DNA直接测序,将基因芯片对KatG 315位点的检测结果与此法进行比较分析. 结果:以罗氏固体培养法获得的INH耐药结果为标准,基因芯片法对菌株INH药敏检测的准确率为73.8%;以DNA测序结果为标准,基因芯片法对KatG 315突变型(AGC→ACC)检测的准确率为88.9%. 结论:大多数结核分支杆菌耐INH是由于KatG 315、inhA-1基因突变所致,采用基因芯片技术可以快速、准确、大规模地确定结核分支杆菌INH耐药突变的部位和性质,其在苏州市地区对结核分枝杆菌的快速和灵敏检测具有极大的应用价值.
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