【摘 要】
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目的 通过SELEX技术筛选获得结核分枝杆菌CFP10-ESAT6蛋白的高亲和性适配子.方法 构建一个长度为78个碱基的随机单链DNA (ssDNA)文库,以微孔板为筛选介质,CFP10-ESAT6蛋白为靶标,SELEX技术筛选获得CFP10-ESAT6的适配子.用DNAMAN软件对其结构进行分析,酶联寡核苷酸吸附试验(enzyme-linked oligonucleotide sorbent a
【机 构】
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广东粤北人民医院检验科,韶关市 512000 同济大学附属肺科医院上海市结核重点实验室,上海市 2
【出 处】
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中国工程科技论坛第115场——临床分子诊断暨第二届中国分子诊断技术大会
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目的 通过SELEX技术筛选获得结核分枝杆菌CFP10-ESAT6蛋白的高亲和性适配子.方法 构建一个长度为78个碱基的随机单链DNA (ssDNA)文库,以微孔板为筛选介质,CFP10-ESAT6蛋白为靶标,SELEX技术筛选获得CFP10-ESAT6的适配子.用DNAMAN软件对其结构进行分析,酶联寡核苷酸吸附试验(enzyme-linked oligonucleotide sorbent assay,ELOSA)测定亲和力.结果 经过15轮筛选,ssDNA文库与CFP10-ESAT6亲和力从0.305提高到1.356.二级结构显示,口袋和茎环结构可能是适配子与CFP10-ESAT6结合的结构基础.结论初步获得了CFP10-ESAT6的高亲和性适配子,为开发结核病诊断和治疗试剂奠定了基础.
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