【摘 要】
：
目的 生命过程中过多的自由基引起的氧化损伤将会导致细胞损伤、病变和非正常死亡,是多种疾病的发病根源.富勒烯的出现为我们研究自由基清除剂开辟了新思路.富勒烯衍生物特殊的化学结构使得一分子富勒烯能与多分子的活性氧反应.最近几年的研究结果表明,在拮抗氧化应激引起细胞损伤方面,富勒醇—富勒烯衍生物之一,对许多细胞株都有良好的作用,比如神经细胞、肝癌细胞以及上皮细胞等.事实上,富勒醇水溶性很低,阻碍了其在生
【机 构】
：
国家纳米科学中心,中关村北一条11号,北京,100190
【出 处】
：
2016(第二届)毒性测试替代方法与转化毒理学(国际)学术研讨会暨有害结局路径(AOP)与风险评估培训会议
论文部分内容阅读
目的 生命过程中过多的自由基引起的氧化损伤将会导致细胞损伤、病变和非正常死亡,是多种疾病的发病根源.富勒烯的出现为我们研究自由基清除剂开辟了新思路.富勒烯衍生物特殊的化学结构使得一分子富勒烯能与多分子的活性氧反应.最近几年的研究结果表明,在拮抗氧化应激引起细胞损伤方面,富勒醇—富勒烯衍生物之一,对许多细胞株都有良好的作用,比如神经细胞、肝癌细胞以及上皮细胞等.事实上,富勒醇水溶性很低,阻碍了其在生物学上的应用,因此,要想在生命医学领域里面应用富勒醇,首先要解决富勒醇的水溶性问题.鉴于此,本研究利用静电纺丝技术,将富勒醇纺入纳米纤维,并对纤维进行了结构表征；同时还研究其对羟自由基和超氧阴离子的清除能力及规律,为该类化合物在医学领域和化妆品领域的应用提供理论依据.方法 1.利用静电纺丝技术合成了五种不同浓度富勒醇的纺丝膜,通过扫描电镜、接触角、拉力测试等分析方法对五种膜进行结构表征.2.在H2O2诱导HaCaT细胞氧化应激损伤模型基础上,以CCK-8比色分析法,Hoechst 33342荧光染色法分析了细胞活性变化情况；以活性氧捕获剂DCFH-DA为标记探针,利用流式细胞仪检测H2O2细胞内ROS产生情况；以Fluo-3 AM探针检测细胞内Ca2+的变化情况,以及通过AnnexinV/PI为标记探针检测细胞凋亡情况,来观察五种不同浓度富勒醇的静电纺丝膜对H2O2诱导HaCaT细胞氧化应激损伤的保护作用.3.探讨了五种不同浓度富勒醇的静电纺丝膜对HaCaT细胞氧化应激抑制作用的机制.对HaCaT细胞内脂质过氧化产物(MDA和三种抗氧化酶(SOD、GSH-Px和CAT)进行检测,运用化学显色法对HaCaT细胞的caspase-3活性变化进行分析,运用流式细胞术分析纺丝膜对HaCaT细胞线粒体膜电位的影响.结果 1.五种纺丝膜直径均为纳米级且均一,均具有较好的机械性能.随着富勒醇浓度的升高,纺丝膜的亲水性增加.2.五种纺丝膜均具有良好的细胞相容性,可以抑制H2O2处理导致的细胞活性降低、细胞核固缩变小、ROS升高、Ca2+浓度升高以及细胞凋亡.3.五种纺丝膜可以抑制H2O2处理所导致的脂质过氧化产物含量升高和抗氧化酶活性降低,可以抑制H2O2处理所导致线粒体去极化以及caspase-3活性升高.结论 本研究利用静电纺丝技术制备了富勒醇浓度不同的五种静电纺丝膜,随着纺丝膜中富勒醇浓度的升高,对自由基的清除作用增强.制备方法简单,条件温和,成本较低,易于推广和应用.
其他文献
模式生物秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,Celegans,简称线虫)因其遗传背景清楚、个体结构简单、生命周期和寿命短等特性,被广泛应用于医学生理学研究的各个领域。近年来,线虫在生态毒理学和卫生毒理学研究和应用领域崭露头角。本实验室自2010年开始引入并优化线虫毒性检测方法,与中科院计算生物所合作,逐步建立了一套基于模式生物线虫的毒性快速筛检和评价体系。从存活率、生命周期
The brain parenchyma injury is irreversible in chronic manganism, also early diagnosis and treatment is still difficult.The dopamine neurons are the ultimate target cells of manganese neurotoxicity.Th
目的 葡萄籽原花青素(Grape-seed proanthocyanidins,GSPs)具有抗氧化和抗炎作用,本实验主要观察其对炎症因子产生的影响及相关信号通路的改变. 方法 体外培养RAW264.7巨噬细胞,加入不同浓度的GSPs作用24小时或者48小时后给予脂多糖(LPS)刺激.用Real-time PCR方法检测细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-10和COX-2的mRNA表达水平,用E
目的 在体外药效学试验的基础上,用敏感种属对一种促血小板生成素拟肽进行安全性评价.方法 主要体外药效学试验结果显示,该药物与SD大鼠的相应配体的亲和力最强,因此,选择敏感种属SD大鼠进行安全性评价.连续4周(3次/周)皮下注射给予促血小板生成素拟肽,剂量分别为0、5、15、50 μg/kg,给药体积1.0 mL/kg,观察大鼠的一般症状,检测其血液学、血液生化及免疫学等指标.分别于给药4周后及停药
目的 前期研究结果表明百草枯(PQ)致神经细胞损害时出现miR-17-5p表达下调.本实验通过miR-17-5p功能获得与功能失去在PQ致小鼠神经母细胞瘤细胞(Neuro-2a)细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期改变中的影响,探讨下调的miR-17-5p在PQ致神经细胞损害中的作用；应用活性氧清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)和Nrf2小分子诱导剂叔丁基对苯二酚(tBHQ)为工具药物预先处理细胞后检测PQ
Paraquat (PQ) is one of the most widely used herbicides in the world.Although available evidence indicates that people exposed to PQ could increase the risk of developing Parkinsons disease (PD) by se
目的 建立基于人细胞系的替代皮肤致敏动物实验的体外检测方法(h-CLAT),并对化学品、日用化学产品和化妆品植物原料进行皮肤致敏性检测。方法 体外培养人急性单核细胞白血病细胞(THP-1),不同浓度受试物与细胞共孵育24h,通过流式细胞仪检测细胞表面标志物CD86和CD54活化的差异,并对11种已知皮肤致敏化学物质和9种未知样品进行皮肤致敏性预测。结果 使用h-CLAT方法准确区分了11种参考物质
目的 凋亡是镉致肾细胞损伤的主要毒性机制之一,线粒体通路可诱发凋亡产生.L-谷氨酰胺(L-glutamine,Gin)与线粒体功能密切相关,且本实验室前期研究发现环境慢性低镉暴露人群尿液中Gin明显改变,提示Gin可能参与了镉致肾细胞毒性损伤过程.本课题旨在研究Gln在镉致肾细胞凋亡损伤中的作用及可能的线粒体通路机制.方法 体外培养人肾近端小管上皮细胞系HK-2细胞,在对数生长期用5和10μmol
The Draize rabbit ocular irritation test (Draize test) is a traditional animal test to assess the ocular irritation hazard of chemicals.Scientific advancements and an increasing number of countries th
目的 探讨氯化镉对大鼠骨密度及骨髓间充质干细胞(MSC)的影响.方法 24只SD雌性大鼠随机分为对照组及氯化镉低、高剂量组,剂量分别为1 mg/kg bw和2mg/kg bw.采用灌胃方式染毒,每周5天,连续38周.染毒结束后取大鼠尿液,测定肌酐、β2-微球蛋白(β2-MG)、N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(NAG)、视黄醇结合蛋白(RBP),左侧股骨测定骨密度,右侧股骨分离培养MSC,常规传代.提