载脂蛋白H在携带乙肝病毒不孕妇女中的表达及其与颗粒细胞凋亡和体外受精-胚胎移植结局相关性研究

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目的观察携带乙肝病毒的不孕妇女血清和卵泡液中apoH蛋白表达水平与HBV感染之间关系及HBV感染与颗粒细胞凋亡水平的关系,以探讨apoH是否参与了HBV影响颗粒细胞凋亡的作用从而影响体外受精治疗结局。方法收集接受常规体外受精/卵细胞浆单精子注射-胚胎移植治疗的137例包括83例携带乙肝病毒(其中59例HBsAg阳性,19例HBeAg阳性)和59例非乙肝(HBsAg阴性)不孕妇女的血清和卵泡液;137例中的55例同时收集颗粒细胞。采用蛋白免疫印迹方法检测血清与卵泡液中apoH蛋白的表达水平,荧光定量PCR方法检测HBV DNA浓度,和实时定量逆转录PCR方法检测颗粒细胞的凋亡相关基因(bcl-2,bax,p53,capase3)的mRNA的表达水平。结果乙肝组血清apoH蛋白表达水平显著高于非乙肝组(p=0.000),其中组间比较HBeAg阳性组明显高与HBsAg阳性组和对照组。卵泡液apoH蛋白表达水平乙肝组同样显著高于非乙肝组(p=0.047),但组间比较仅HBeAg阳性组高于对照组。线性分析显示血清apoH蛋白表达水平与卵泡液apoH呈中等程度线性相关(r=0.414,p=0.000)。血清apoH蛋白表达水平与血清HBV DNA含量不一定相关,但卵泡液中apoH蛋白表达水平与卵泡液HBV DNA含量呈正相关。乙肝不孕妇女颗粒细胞capase3基因mRNA水平明显高于非乙肝妇女(p=0.025),不同HBV感染及复制状态下HBV感染妇女2PN受精率明显高于而优质胚胎率明显低于非乙肝对照组(p<0.05)。血清和卵泡液apoH蛋白水平与颗粒细胞凋亡及IVF妊娠结局无相关性(p>0.05)。结论携带乙肝病毒不孕妇女血清apoH蛋白表达水平及血清HBeAg阳性不孕妇女卵泡液apoH蛋白表达水平均高于非乙肝不孕妇女。不孕妇女卵泡液apoH蛋白表达水平与卵泡液HBV DNA含量呈正相关。HBV感染不孕妇女颗粒细胞凋亡增加和ⅣF周期2PN受精率增加和优质胚胎率下降。血清和卵泡液apoH蛋白表达水平与颗粒细胞凋亡和IVF取卵周期妊娠结局无相关性。
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