【摘 要】
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目的:观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对肝癌Hep3B细胞自噬和细胞增殖水平的影响及意义。方法:DMEM培养基常规培养Hep3B细胞,分组给予不同浓度和不同时长EGCG作用。通过透射电镜观察EGCG对细胞自噬泡形成的影响;实时定量逆转录PCR及免疫印迹检测自噬相关基因及蛋白分子主达;通过MTT法检测细胞增殖抑制率,计算IC50。结果:EGCG作用于Hep3B细胞后,细胞内自噬泡的形成明显减
【机 构】
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广西医科大学第一附属医院新药开发中心 530021 广西壮族自治区人民医院消化内科
【出 处】
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第八届全国肝脏疾病临床学术大会暨第四届中国-印度尼西亚肝病峰会
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目的:观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对肝癌Hep3B细胞自噬和细胞增殖水平的影响及意义。方法:DMEM培养基常规培养Hep3B细胞,分组给予不同浓度和不同时长EGCG作用。通过透射电镜观察EGCG对细胞自噬泡形成的影响;实时定量逆转录PCR及免疫印迹检测自噬相关基因及蛋白分子主达;通过MTT法检测细胞增殖抑制率,计算IC50。结果:EGCG作用于Hep3B细胞后,细胞内自噬泡的形成明显减少,自噬相关基因beclinl和Atg5的表达下降。Hep3B细胞增殖抑制率与EGCG作用浓度(r=0.925,P<0.05)及作用时长均呈正相关(24、48和72 h的相关系数r分别为0.873,0.96,0.978,P<0.05),24h、48h及72h的EGCG作用的It50分别为(108.32±4.63)μg/ml、(57.4士2.15)μg/ml和(13.71±2.58)μg/ml。自噬相关基因beclinl和Atg5 mRNA表达水平与EGCG浓度呈负相关(相关系数,分别为-0.923、-0.848;P<0.05),与细胞存活率正相关(r=0.999、r=0.990,P<0.01);beclinl和Atg5蛋白质水平变化与其mRNA变化趋势一致。结论:EGCG具有明显下调肝癌Hep3B细胞自噬水平的作用;可能是其抑制肝癌细胞增殖的重要机制。
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