【摘 要】
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通过对由具有6个无毒基因不同表现型的马铃薯晚疫病菌构建的4个混合池进行cDNA-AFLP分析、共获得85个与无毒基因相关的差异表达片段,其中与无毒基因Avr1、Avr2、Avr3-Avr10-Avr11、Avr4相关的差异表达片段分别为20,28,16和21个.将这些差异表达片段对20个晚疫病病菌个体进行无毒基因差异表达验证,得到无毒基因连锁群Avr3-Avr10-Avr11的修选片段1个,即A1
【机 构】
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中国农科院蔬菜花卉研究所(北京);Laboratory of Phytopathology,Wageningen University and Graduate School of Experimen
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通过对由具有6个无毒基因不同表现型的马铃薯晚疫病菌构建的4个混合池进行cDNA-AFLP分析、共获得85个与无毒基因相关的差异表达片段,其中与无毒基因Avr1、Avr2、Avr3-Avr10-Avr11、Avr4相关的差异表达片段分别为20,28,16和21个.将这些差异表达片段对20个晚疫病病菌个体进行无毒基因差异表达验证,得到无毒基因连锁群Avr3-Avr10-Avr11的修选片段1个,即A11T13Avr3-10-11S157;无毒基因Avr4的候选片段2个,即A24T19Avr4S125和A24T24Avr4S144.Blast分析表明:A11T13Avr3-10-11S157与马铃薯晚疫病菌正萌发孢子囊(germinating sporangium)EST(expressed sequence tag)库中的序列PG001F10.XT7同源;A24T19Avr4125与晚疫病菌正萌发泡囊(germinating cyst)EST库中的PH051G10.X17部分序列完全一致;未发现与A24T24Avr4S144同源的序列,说明此序列可能为一新的马铃薯晚疫病菌EST.A24T194Avr4S125与EST PH051 G10.XT7的序列一致性表明选择正工萌发的孢囊时期鉴定无毒基因的可行性,也为进一步快速获得全长无毒基因Avr4及进行功能验证奠定了基础.
其他文献
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利用cDNA-AFLP技术,以A18和T16引物为引物对,对矮脚黄白菜(Brassica campestris L.ssp.chinensis Makino var.communis Tsen et Lee cv.Aijiaohuang)雄性不育两系不育株系与可育株系的表达差异进行分析,结果在可育中蕾和可育大蕾中特异表达的差异条带一条,且可育大蕾表达量强于可育中蕾;可育系连莲座期叶,开花期叶、花茎
根据GenBank中登录的拟南芥WRKY转录因子的保守序列设计引物,采用RT-PCR和3-RACE方法,从SA处理的不结球白菜抗病自交系苏州青中,获得了473bp的DNA片段.序列分析表明,该序列含有WRKY转录因子共有的WRKYGQK保守结构域,与拟南芥AtWRKY18氨基酸序列的同源性为83﹪,与拟南芥AtWRKY60同源性为72﹪,表明已经成功克隆了不结球白菜WRKY1基因3末端cDNA序列
根据从Pentadiplandra brazzeana Baillon中分离获得的Brazzein甜蛋白基因的氨基酸序列,人工合成了全长168bp(含有转录起始位点ATG以及终止子TAA)Brazzein甜蛋白基因,并克隆至pMD18-Teasy vector上.测序结果表明所获得的基因与Brazzein甜蛋白基因序列完全相符;同时从番茄中克隆果实特异表达启动子pE8,构建番茄果实特异表达载体pB
对不结球白菜细胞质雄性不育系及其保持系DNA进行RAPD分析,在其不育系中获得了两条稳定扩增的片段OPAX1和OPAF12,序列测定结果证明OPAX1DNA序列全长为773bp,其碱基组成为A+T=54.20﹪,A+G=42.69﹪.序列中含有多个起始和终止密码子,推断可以编码含9~74个氨基酸残基的9个多肽片段.通过序列查询发现它与已报道序列的同源性均很低,表明该片段为新发现的不结球白菜DNA序
采用RT-PCR方法,从甜瓜果实总RNA中扩增出目标cDNA片段(MAI),在GenBank中登记号为AF490425.将该基因片段定向插入到pPOK2的BamH Ⅰ/Sma Ⅰ克隆位点,构建了Anti-MAI植物表达双元载体,在根癌农杆菌介导下转化烟草,经PCR和PCR-Southern杂交检测,证明此基因已整合入烟草的核基因组中.
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通过真空渗入法获得了转抗虫基因pinⅡ的不结球白菜.各独立转化株系在温室经自交后,对自交一代(T2代)进行了小菜蛾连续饲喂实验,并利用标记基因bar介导的除草剂Basta抗性进行了自交一代(T2)及二代(T3)中外源基因的遗传分离情况分析.结果表明获得的转pinⅡ基因白菜一些株系具有明显的抗虫效果,主要表现在影响小菜蛾的虫体发育,降低虫体体重,提高死亡率和降低虫体的化蛹率、羽化率等方面.通过除草剂
对108份我国茄子主要地方品种和35份主要选育品种进行了基于形态性状和基于PAPD/ISSR标记的遗传多样性分析,结果表明地方品种的遗传多样性(遗传多样性指数总和18.06)高于选育品种(15.83).聚类分析表明,地方品种和选育品种都可以分为4个类群,并在多变量对应分析中得到验证.此外,我们的研究还表明,在茄子种质资源遗传多样性研究中,ISSR标记是一种多态性丰富、简便高效的标记手段.