【摘 要】
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本文以绵羊为研究对象，用切剖法获得卵母细胞，收集卵丘细胞一卵母细胞复合体，进行成熟培养。COCs体外成熟19h后，去除周围卵丘细胞并将其离心洗涤，培养2代后用含有不同浓度Scriptaid的培养液进行接触抑制处理，然后用0.25％胰蛋白酶消化处理2-3min，用移液枪吹打成单个细胞。将卵母细胞在显微操作仪下去除第一机体及周围的少量胞质，并注入卵丘细胞，进行融合。随后置于培养液中培养3h后观察融合结
【机 构】
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河北农业大学动物科技学院,河北保定071000 河北农业大学动物科技学院,河北保定071000;河
【出 处】
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第七次全国动物生物技术学术研讨会暨新疆畜牧科学院第六次学术年会
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本文以绵羊为研究对象，用切剖法获得卵母细胞，收集卵丘细胞一卵母细胞复合体，进行成熟培养。COCs体外成熟19h后，去除周围卵丘细胞并将其离心洗涤，培养2代后用含有不同浓度Scriptaid的培养液进行接触抑制处理，然后用0.25％胰蛋白酶消化处理2-3min，用移液枪吹打成单个细胞。将卵母细胞在显微操作仪下去除第一机体及周围的少量胞质，并注入卵丘细胞，进行融合。随后置于培养液中培养3h后观察融合结果，再对融合后的胚胎进行激活。将胚胎在含有不同浓度Scriptaid的发育液中培养。然后对不同时期的胚胎进行免疫染色。研究表明：采用0.21μmo1/L的Scriptaid分别处理绵羊卵丘细胞和核移植胚胎后能提高胚胎体外发育能力;但采用0.2μmo1/L Scriptaid同时处理绵羊卵丘细胞及胚胎时所得胚胎体外发育能力低于单独处理供体卵丘细胞或胚胎时的效果;添加Scriptaid可显著提高绵羊核移植胚胎1一细胞、2一细胞、4一细胞和8一细胞期H4K12乙酞化水平。
其他文献
研究目的：潘氏细胞(或称帕内特细胞,Paneth cell)位于小肠腺基底部,细胞呈锥形,核圆或卵圆,细胞内有粗大嗜酸性颗粒,内含α 防御素、溶菌酶、磷脂酶A2、sIgA 等多种抗微生物成分,这些成分在潘氏细胞脱颗粒时被释放到肠腔,成为肠黏膜屏障的重要效应分子.本研究主要探讨双硫腙对小鼠肠腺潘氏细胞的选择性破坏作用.材料方法：成年小鼠腹腔注射100 mg/kg 体重的双硫腙,分别在4 h、6 h、
To understand the protective role of Hsp60 against stress damages and responsible for potential sudden death in stressed animals,the correlation between the variations of Hsp60 and its corresponding m
本研究对北京地区的屠宰肉鸡肝脏、血清和胆汁样品进行了HBV相关抗原抗体的检测和病理学观察,以了解北京地区屠宰肉鸡中感染HBV 的流行情况,为进一步揭示HBV在人与动物之间的感染传播及潜在的流行途径和规律提供参考.本研究结果表明,所检测肝脏样品在显微镜下观察出现病毒性肝炎典型的病理变化特点,如肝脏发生变性坏死、淋巴细胞浸润和纤维结缔组织增生等变化.同时利用免疫组化检测HBV 相关抗原,结果也表明肝细
2012年12月1日北京动物园1只黑麂死亡，本实验室对其进行了剖检、组织病理学观察和病原学检测。综合大体剖检、组织病理学观察及病原学诊断结果该死亡黑麂可能是感染了疤疹病毒，并继发有大肠杆菌感染。
本试验使用自拟组方“暖宫散”和“气血通”对双城市周边乡镇患卵巢静止、持久黄体、卵巢囊肿三种卵巢性不孕症的奶牛进行治疗.试验期末,测定自拟组方对试验奶牛发情率、受孕率的影响.试验结果表明:用“暖宫散”治疗卵巢静止41例,平均发情率为95.1％,受孕率为80.5％;用“气血通”治疗持久黄体16例,平均发情率为93％,受孕率为81％;用“气血通”治疗卵巢囊肿14例,平均发情率为92.9％,受孕率为85.
食品安全问题由来己久，国家领导人高度重视。动物源性食品安全问题包括病原微生物污染、疫病和兽药残留，中兽医药能够增进国家食品安全的保障能力，研究了其在现代养殖业和促进动物源性食品安全中的应用思路，提倡畜禽健康养殖，保健为主，治疗为辅。
禽类胚胎从受精到形成个体要经过体内和体外两个发育阶段.在体内阶段时,胚胎已发育为含有60000个细胞的X期胚盘.因此,若像哺乳动物那样在受精后的短时间内采集卵子并进行DNA注射或者核移植等技术操作都很困难.本研究通过对采用对X期鸡胚胚盘注射慢病毒的方法成功的获得了输卵管特异表达人溶菌酶的转基因鸡.对进行胚盘注射操作后的鸡胚,我们采用的是Perry的三期培养法,其操作流程包括StageX(EG&K)
本试验构建了M蛋白保守区基因的shRNA，利用慢病毒转染法生产了表达此shRNA的转基因鸡。Tg单核巨噬细胞在IBV感染后，产生了对病毒mRNA与蛋白的抑制作用，表明构建的RNAi对IBV感染有抑制作用。IBV的侵染并未引起Tg组单核巨噬细胞强烈的炎性反应与氧化损伤，并且IBV蛋白的表达显著低于WT组，表明RNAi抑制了IBV的复制，并对干扰的病毒进行了有效的清理。对G1代阳性鸡进行攻毒试验，GI
本研究利用TALEN技术成功获得了GGTA1基因敲除克隆猪。与常规的基因打靶技术相比，利用TALEN技术介导的基因敲除效率在单细胞水平可以达到20％-26%之间，而常规同源重组的基因打靶效率仅在10-6～10-7,并且通过一次转染，可以实现一次性双等位基因的敲除，这在常规基因打靶中是无法实现的，这样极大缩短了基因敲除纯合子的培育时间，为生产基因敲除动物提供了极大的便利。另外，利用TALEN技术介导
体外获取的卵母细胞其周围包括的卵丘细胞数量不一，传统上将胞质均匀的卵母细胞复合体按卵丘细胞层数分为三类:A类周围有5层以上卵丘细胞包被;B类周围有5层以下，1层以上卵丘细胞包被;C类仅有单层卵丘细胞或无卵丘细胞包被。在卵母细胞培养中，一般C类COCs弃之不用，而B类一直未有定论，而在生产操作中，一般将COCs分为两类，胞质均与包被三层以上的定义为优级卵，三层以下一层以上的定义为次级卵，本研究就此探