四川山地乌骨鸡、颐康鸡IL-2与γ干扰素基因克隆测序及真核表达质粒的构建

来源 :中国畜牧兽医学会禽病学分会禽流感及免疫抑制病论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nixiangtama
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本研究根据Genebank中鸡IFN-γ和IL-2序列设计引物,采用RT-PCR法从地方品种山地乌骨鸡的外周淋巴细胞RNA中克隆了CHIFN-γ、CHIL-2基因,并进行了序列分析.结果发现:克隆的IFN基因cDNA全长549bp,开放阅读框为495bp,编码164个氨基酸.IL-2基因cDNA全长549bp,开放阅读框为432bp,编码143个氨基酸.将山地乌骨鸡IFN-γ、IL2基因测序结果与Genebank上的序列用DNAstar进行分析发现,IFN-γ、IL-2与Genebank上序列同源性分别为97.2-100﹪和98.4-99.3﹪.该基因经HindⅢ和KpnⅠ双酶切后,插入同样经HindⅢ和KpnⅠ双酶切真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建真核表达质粒,研制出分子佐剂PCIFN-γ.该分子免疫佐剂PCIFN-γ可作为禽类疫苗的免疫增强剂,为进一步研究奠定基础.
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