猪血浆中氟苯尼考检测样品的制备及其含量的液相色谱测定

来源 :第22届国际猪兽医协会大会(IPVS2012) | 被引量 : 0次 | 上传用户:chinesechinese123456
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  目的:在肌内注射过标准药品或仿制药品后,研究液相色谱结合二极管阵列的方法(HPLC-DAD)测定猪血清中氟苯尼考含量的效果,并评价了蛋白沉淀技术制备样品的有效性。方法:将体重在80到89kg的30头健康猪分成三组:标准药品处理组、仿制药品处理组及对照组。按20mg/kg体重进行肌注氟苯尼考两次,间隔48小时。在首次给药的0、2、4、24、48、50、72、96、120、144、168、192、216和240小时后采集血清样品。采用甲醇、85%正磷酸和氯化钠,按蛋白沉淀法分离血清样品中的氟苯尼考。在224nm,30℃条件下采用HPLC-DAD法对C18RP柱中的氟苯尼考样品进行鉴定和定量分析。采用乙睛:水为80:20,85%正磷酸调pH为3.0的混合液作为流动相。使用氯霉素作为参照。按内标法建立线性关系(r2>0.999),检测线为0.01μg/mL,定量线为0.04μg/mL。结果:日内和日间的精确度小于2.1%和2.2%。平均回收率为89.3%±2.6%。结论:HPLC-DAD方法具有敏感、线性关系好、精准度高的特点,可被用于生物等效性研究上。
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