海金沙诱导H1299细胞抗禽传染性支气管炎病毒的机理

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传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)属于冠状病毒科(Coronaviridae),γ冠状病毒属,是一种具囊膜的正单链RNA病毒。其引起的鸡传染性支气管炎(infectious bronchitis,IB)给家禽养殖业造成了巨大的经济损失。对该病的防控至今尚无防效显著的化学药物,在生产上主要依赖于疫苗的使用。但不同基因型或血清型毒株的存在和新变异毒株的不断出现,会导致免疫效果差甚至完全无效,因此,探寻经济、安全有效的防控方法尤为重要。许多药用植物被证明具有抗病毒作用,众多中药配方已被用于许多病毒病的预防和防治,但对其抗病毒的机理研究甚少。本试验通过对10种植物的抗IBV活性进行检测,筛选出3种抗病毒作用较强的植物,利用现代分子生物学技术研究并初步揭示了海金沙提取物抗IBV的分子机理。研究结果为进一步阐明海金沙的抗病毒机理打下了基础,也为开发利用药用植物来有效防控病毒病提供了理论依据。实验结果总结如下:1.对海金沙等10中植物进行了抗IBV活性检测,发现丹皮、千里光、龙葵、皂荚和海金沙植物提取物在不同程度上均能抑制IBV的增殖,其中海金沙、蛇麻子和皂荚植物的效果更为显著;2.RT-PCR检测结果显示在海金沙甲醇提取物处理过的H1299细胞中,IBV RNA的合成量明显减少;Western blot检测结果表明在海金沙甲醇提取物处理过的H1299细胞中,IBV N蛋白的表达量也明显减少。这些结果表明,海金沙甲醇提取物可诱导H1299细胞产生抗IBV的作用;3.用荧光定量RT-PCR和Western blot的方法分析海金沙提取物对细胞因子等的调控作用,结果表明:在IBV感染海金沙甲醇提取物处理过的H1299细胞中,β干扰素的表达量增加,而细胞因子IL-6、IL-8的表达量没有明显的变化。
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