流式荧光分子变构SELEX筛选C4-HSL适配体及其体外抑制铜绿假单胞菌生物膜的研究

来源 :第六届中国临床微生物学大会暨微生物学与免疫学论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:C12sdn
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  铜绿假单胞菌为一种常见的条件致病菌,是烧伤感染、导尿管尿路感染,呼吸机获得性肺炎菌血症的主要病原菌,尤其是免疫功能低下患者的主要致病菌,如肿瘤、移植、HIV感染者等。同时,它也是囊性纤维化患者发病和死亡的主要原因。很多细菌(包括铜绿假单胞菌)可利用外源性DNA作为碳源,增强其生物膜形成的能力。这些外源性DNA主要来自于感染部位趋化聚集的炎性细胞。这些细胞在抗感染的同时,也不断地死亡分解,释放出大量的DNA和RNA而被细菌利用。因此,外源性DNA可以促进生物膜的形成。为避免DNA适配体也被细菌用作外源性DNA,本研究在体外抑制实验时,始终保持高浓度适配体(5000000∶1),同时,用原始文库作阴性对照,确保有充分余量的适配体来结合细菌分泌的C4-HSL信号分子。扫描电镜证实,DNA适配体在体外可以显著抑制铜绿假单胞菌的生物膜形成,抑制后的生物膜稀薄疏松,菌体裸露,这对抗生素抗感染治疗尤其重要。结晶紫染色定量测定生物膜量也显示,抑制后的生物膜量只有对照组的1/4弱,显示适配体技术抑制生物膜形成具有较好的应用前景。
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