【摘 要】
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应用RT-PCR技术分别从脂多糖(LPS)活化的山羊脾脏细胞和肺泡巨噬细胞中克隆到编码山羊白细胞介素(IL-)18成熟蛋白的cDNA基因,其大小为480bp.序列分析表明gIL-18与奶牛和绵羊的IL-18基因序列高度同源.将gIL-18克隆到pET-32a(+)质粒载体中,转化大肠杆菌BL21后,IPTG诱导后经SDS-PAGE分析,得到了分子量为38kD的融合蛋白.使用半定量RT-PCR对山羊
【机 构】
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山东农业大学动物科技学院(山东泰安) 山东省农业科学院奶牛研究中心(山东济南)
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应用RT-PCR技术分别从脂多糖(LPS)活化的山羊脾脏细胞和肺泡巨噬细胞中克隆到编码山羊白细胞介素(IL-)18成熟蛋白的cDNA基因,其大小为480bp.序列分析表明gIL-18与奶牛和绵羊的IL-18基因序列高度同源.将gIL-18克隆到pET-32a(+)质粒载体中,转化大肠杆菌BL21后,IPTG诱导后经SDS-PAGE分析,得到了分子量为38kD的融合蛋白.使用半定量RT-PCR对山羊IL-18 mRNA的体内表达进行了测定,发现山羊巨噬细胞可以持续的表达IL-18 mRNA,不论是否加入刺激剂,而被LPS活化的PBMC只是微弱的表达IL-18 mRNA,肝脏和脾脏细胞经LPS活化后也可以检测到IL-18 mRNA的表达,其水平明显高于PBMCs.不同细胞中表达情况的差异可能反映了其产生成熟IL-18的能力.
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