【摘 要】
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目的 研究弓形虫自噬在速、缓殖子转化中的调控作用.方法 利用不依赖连接酶的克隆技术在弓形虫自噬相关蛋白7(TgAtg7)的C端添加HA标签,构建两个转基因虫株：RH TgAtg7-HA和Pru TgAtg7-HA.基于这两个转基因虫株,分别从转录水平和蛋白表达水平观察三个自噬相关蛋白(TgAtg3、TgAtg7和TgAtg8)在速、缓殖子中的变化.并以TgAtg8为自噬体标志物,评价速、缓殖子期自
【机 构】
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温州医科大学寄生虫学教研室,温州 325035 温州医科大学寄生虫学教研室,温州 325035;温
【出 处】
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2015年浙江省医学会热带病与寄生虫病学分会学术会议
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目的 研究弓形虫自噬在速、缓殖子转化中的调控作用.方法 利用不依赖连接酶的克隆技术在弓形虫自噬相关蛋白7(TgAtg7)的C端添加HA标签,构建两个转基因虫株：RH TgAtg7-HA和Pru TgAtg7-HA.基于这两个转基因虫株,分别从转录水平和蛋白表达水平观察三个自噬相关蛋白(TgAtg3、TgAtg7和TgAtg8)在速、缓殖子中的变化.并以TgAtg8为自噬体标志物,评价速、缓殖子期自噬水平.最后,利用自噬诱导剂(雷帕霉素)和自噬抑制剂(3-MA)分别对Pru TgAtg7-HA虫株处理,观察缓殖子转化情况,明确速、缓殖子转化与弓形虫自噬的关系.结果 相比速殖子期,TgAtg3和TgAtg8在缓殖子期的表达显著降低.同时,TgAtg8自噬斑数量在缓殖子期明显少于速殖子期,说明自噬在缓殖子期呈下调趋势.药物处理后,雷帕霉素处理组缓殖子期特异性蛋白(BAG1)显著降低,而3-MA处理后却明显增高.表明自噬参与了弓形虫体外的速、缓殖子转化.结论 弓形虫自噬在调控速、缓殖子转化过程中起到关键作用.
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