聚苯乙烯浸渍纸基质的制备及在蛋白和多肽分析中的研究

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纸喷雾电离源-质谱分析法[1,2]由于具有简单、快速、样品无需预处理等特点,己被广泛应用于不同样品的检测分析,其中包括复杂生物基质中药物化合物分析[3,4]、食品中有毒有害化合物检测[5]、化学反应监测[6]、无机/有机聚合物材料表征等[7,8]。蛋白和多肽由于在生命科学中的重要意义,现今己发展起来多种方法用于不同样品中该类化合物的检测(如液相色谱-质谱法、酶联免疫分析、免疫沉淀反应等)。尽管如上方法在蛋白和多肽化合物检测方面发挥着重要作用,但是这些技术在分析前需繁琐的样品预处理,耗时耗力,不利于样品快速分析,为此建立简单、快速的分析方法对于蛋白和多肽分析具有重要意义。为了削减蛋白和多肽在纸喷雾分析过程中与纸基质的相互作用力,提高质谱分析的灵敏度,最近我们发展了一种制备聚苯乙烯浸渍纸基质的新方法,该方法是先将聚苯乙烯微球采用真空抽滤涂覆的方式负载在商品滤纸表面[9],然后再进行低温烘烤,所得纸基质具有柔韧性和制备重复性好等优点。同时将聚苯乙烯浸渍纸作为纸喷雾电离源基质用于多种复杂样品中蛋白和多肽样品的快速分析,其质谱分析灵敏度可得到有效提高。图1a-b为经聚苯乙烯浸渍纸基质的照片图和局部放大SEM图,可看出该基质柔韧性好、表面均一,其表面是由聚苯乙烯聚合物所组成,含有大量的孔结构。为了比较该基质在实际样品分析中的性能,本研究比较了商品滤纸与聚苯乙烯浸渍纸基质对血样中血红蛋白的分析性能。当采用商品滤纸作为纸基质进行分析时,由图1c可看出,无法得到血红蛋白的特征离子峰;当采用聚苯乙烯浸渍纸基质时,可得到肌红蛋白较强的特征峰(图1d),经比较发现其质谱分析灵敏度相比于滤纸可提高约117倍,说明了制备出的聚苯乙浸渍纸作为纸喷雾电离源基质可有效提高质谱技术对蛋白等化合物的分析灵敏度。
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