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目的:研究中枢神经系统中HIF-1α和Notch1间的关系,并探讨其在阿尔茨海默病发病机制中的作用.
方法:体外原代培养小鼠皮层神经元及胶质细胞的混合体系,通过电穿孔转染法沉默细胞中HIF-1α/Notch1的基因表达,应用RT-PCR及western blot方法检测相应Notch1/HIF-1α基因及蛋白水平的表达变化.应用ADDLs干预原代培养的神经元及胶质细胞的混合体系,建立AD的体外细胞模型,应用western blot方法检测不同时点(4,小时,12小时,24小时)不同条件下(空白对照组,空白对照+ADDLs组,沉默HIF-1α/Notch1组,沉默HIF-1α/Notch1+ADDLs组)细胞内HIF-1α/Notch1的表达情况.并检测应用ADDLs干预细胞后不同条件不同时点细胞凋亡相关蛋白caspase-3的表达情况.应用APPSWE转基因小鼠作为AD模型鼠,建立缺氧实验动物模型,应用westem blot方法检测不同分组(野生型正常氧组,野生型缺氧组,APPSWE正常氧组,APPSWE缺氧组)实验动物脑内HIF-1α和Notch1的表达情况.
结果:在小鼠体外原代皮层神经元及胶质细胞的混合培养体系中，抑制HIF-lα/Notch1的表达会相应的降低Notchl/HIF-1α的表达水平。
结论:1、无论是在正常培养条件下的体外原代神经元及胶质细胞的混合培养体系，还是ADDLs所诱导的AD体外细胞模型，还是在AD动物模型中HIF-lα和Notchl是密切相关的；2、HIF-1α/Notch1与ADDLs所诱导的细胞凋亡相关。也就是说，无论是在生理条件下还是在病理条件下，HIF-lα与Notchl均是密切相关，且二者参与了ADDLs诱导的细胞凋亡过程，可能在AD的发生发展过程有重要的作用。