A Novel Comprehensively Feasible System Profiling of Protein Complexomics

来源 :第十六届有机分析与生物分析学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zlk84
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Major challenges of ‘protein complexomics’ are to separate intact protein complexes or interactional proteins without dissociation or denaturation from complex biological samples and characterize structural subunits as standard patterns for protein complexomics. To address these issues we developed a novel approach termed broad-spectrum four-dimensional orthogonal electrophoresis (BS4-DE) system, composed of two parts: non-denaturing part I and denaturing part II. Here we developed a mild acidic-native-PAGE to constitute part I together with basic-native-PAGE and ensure the range of BS4-DE system application. We selected ammonium hydroxide to extract protein from gels as a connection of part I and part II without gaps, speculated the extractive mechanism. Using this approach, we focus on blood proteome, a protein complexes and interactional proteins rich pool that is challenging to study. Our results indicated that BS4-DE system could be applied to blood protein complexomics investigation, providing a comprehensively feasible approach for disease proteomics.
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本文通过在毛细管聚合物整体柱表面修饰金纳米粒子,将α-葡萄糖苷酶固定于其表面,制备了一种聚合物整体柱酶微反应器。考察了该固定化酶的催化活性,并对该酶有抑制作用的中草药粗提物进行了筛选。
采用维生素C在碱性中不稳定的性质,本文采用光纤光谱技术建立了快速测定维生素C的新方法。结果表明:维生素C浓度在1.0-12μg/mL范围内与光信号呈良好的线性关系,检出限(S/N=3)为0.3μg/mL,加标回收率在99-104%之间。本文方法具有操作简便、分析速度快和灵敏度高等特点,成功应用于饮料的分析。
采用电化学方法制备了聚苯胺-碳纳米管-硅钨酸(PAn-CNT-SiW12)复合膜修饰电极,研究了抗坏血酸(AA)在该电极上的电催化氧化行为。考察了修饰电极对AA的安培响应。结果表明,在3到115μmol/L浓度范围内,AA的氧化峰电流与其浓度呈现良好的线性关系。
纳米材料的功能化及其信号放大技术已广泛应用于生物分析新方法的构建,本文就本研究组在这方面的进展作一总结,已展示纳米信号放大及其在生物传感中的应用情况。
设计了含离子识别区域和探针嵌入的功能DNA,该DNA用于Ag+和Hg2+离子的识别和Ru(phen)32+探针的嵌入,以此为基础构筑了电化学发光传感器用于两种离子的高灵敏检测;利用四面体结构的DNA固定Hg2+识别单元,结合富鸟嘌呤碱基与亚甲基蓝强的静电作用,发展了一种简单、灵敏的电化学检测Hg2+的新方法。
本文合成了几种不同粒径的介孔二氧化硅纳米粒子(25-60nm),并将IgG抗体和辣根过氧化物酶同时固定在MSN上,制备集群辣根过氧化物酶-IgG抗体共轭物,通过对鲁米诺-过氧化氢的催化化学发光反应的实验,证明当鲁米诺和过氧化氢浓度一定时,这种集群酶-抗体共轭物的催化性能比典型的无机催化剂(如 Cu2+,Co2+,和Cr3+),也比单独的辣根过氧化物酶要强得多。据此建立了一种基于介孔二氧化硅纳米粒子
将酪氨酸酶保护的纳米金组装在1-芘丁酸琥珀酰亚胺酯功能化的氧化石墨烯的表面,并修饰在丝网印刷电极上,制成可抛式电化学生物传感器。该传感器为酪氨酸酶分子保持生物活性提供了良好的微环境。邻苯二酚在传感器上响应迅速,呈现出较好的稳定性和灵敏度,检测限为8.2×10-8 mol/L,可以应用于酚类化合物的现场测定之中。
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本研究采用乙腈沉淀法对67例食管癌患者及27例健康人的血浆样品进行前处理,并采用RRLC-MS/MS技术进行检测分析,通过数据预处理及多变量统计分析方法如OPLS-DA,对获得的数据进行统计分析,发现所建立的多变量统计模型对疾病组与健康组的分离能力良好;进一步筛选出与疾病相关的一系列可能生物标志物。