Notch信号通路在骨髓间充质干细胞成脂分化作用的研究

来源 :首届全国组织修复与再生医学大会暨国际组织修复与再生医学学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bbboy
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  目的:Notch信号通路是一条高度保守的跨膜信号通路,参与调控细胞生长发育和分化过程,本研究旨在探讨Notch信号通路在骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)成脂分化能力的影响,进一步了解BM-MSCs分化机制.方法 取健康供者骨髓获得BM-MSCs,流式检测其免疫表型和多向分化潜能鉴定BM-MSCs.Real-time PCR检测成脂分化前后Notch信号通路相应受体、配体及下游效应分子mRNA表达情况;应用Notch抑制剂5 μM DAPT(N-[N-(3,5-difluorophenacetyl-L-alanyl)]-S-phenylglycine t-butylester)检测其成脂能力变化,设立溶剂DMSO对照组.结果:在成脂诱导分化过程中Notch受体NOTCH1,NOTCH2和NOTCH3明显降低(P<0.05),NOTCH4有下降趋势,无统计学意义(P>0.05);Notch配体DLL1,DLL3,DLL4,DLK1和DLK2明显下降(P<0.05),Jagged1和Jagged2无明显变化;Notch依赖的转录因子HEY1下降明显(P<0.05),HES1和HEY2无明显变化(P>0.05),加入DAPT后,油红染色显示DAPT组相比常规诱导组和DMSO组,脂肪小滴明显增加,成脂相关基因PPAR γ和C/EBPα mRNA和蛋白表达水平与常规诱导组和DMSO组相比,DAPT组明显升高(P<0.05).结论 Notch信号通路在BM-MSCs成脂分化过程中明显下调,抑制Notch信号表达可以促进BM-MSCs成脂分化能力.
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