【摘 要】
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根据Genebank中已发表的序列(M64242)为参考设计引物,用SDS裂解液配合蛋白酶K的方法提取总RNA,用RT-PCR方法从6个旋毛虫隔离种的成囊前期幼虫中扩增出了49kuES结构基因,将目
【机 构】
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东北农业大学动物医学学院,黑龙江,哈尔滨,150030
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根据Genebank中已发表的序列(M64242)为参考设计引物,用SDS裂解液配合蛋白酶K的方法提取总RNA,用RT-PCR方法从6个旋毛虫隔离种的成囊前期幼虫中扩增出了49kuES结构基因,将目的基因定向克隆入pMD18-T载体,转化大肠杆菌TG1.用PCR、限制性内切酶EcoR I和BamHI进行单、双酶切鉴定,阳性质粒测序.成功克隆了6个旋毛虫隔离种成囊前期幼虫49kuES结构基因,序列分析结果显示:49kuES结构基因的大小为948bp,基因的保守性很强,序列同源性比较高,不同隔离种之间的差异很小,其编码蛋白的抗原性也基本相同.
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