【摘 要】
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目的 制备Rv3287c重组蛋白,以期发现一种新型的针对潜伏感染的诊断标记物或候选疫苗.方法 基因合成结核分枝杆菌Rv3287c,复苏穿刺菌,提取质粒puc57-rv3287c,双酶切凝胶回
【机 构】
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100091 北京,解放军第三○九医院全军结核病研究所 全军结核病防治重点实验室 结核病诊疗新技术北京市重点实验室
【出 处】
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全国结核病诊疗与防控暨第二届抗结核药物不良反应防治新进展研讨会
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目的 制备Rv3287c重组蛋白,以期发现一种新型的针对潜伏感染的诊断标记物或候选疫苗.方法 基因合成结核分枝杆菌Rv3287c,复苏穿刺菌,提取质粒puc57-rv3287c,双酶切凝胶回收rv3287c基因片段,连接到pET30a载体上,构建pET30a-rv3287c重组质粒,然后转化E.coli BL21 (DE3),筛选阳性克隆,进行酶切及测序鉴定,经IPTG诱导表达后,应用Ni+-NTA亲和柱纯化重组蛋白.结果 成功构建pET30a-rv3287c重组质粒,得到重组蛋白Rv3287c,其在E.coli BL21 (DE3)中主要以包涵体形式表达,分子量(15kDa)与预期相符.结论 成功制备结核分枝杆菌Rv3287c重组蛋白为结核潜伏感染的预防和控制奠定实验基础.
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