【摘 要】
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目的：将分离、富集的精原细胞接种于制备好的支持细胞饲养层上进行培养，研究睾丸支持细胞对睾丸生精细胞体外培养的影响，同时检测雷公藤甲素对体外单独培养睾丸支持细胞、生精细胞以及两者体外共培养的毒性。方法：(1)取鼠龄16～22d的雄性ICR小鼠睾丸，采用胶原酶、透明质酸酶、胰蛋白酶和DNA酶消化分离支持细胞，经低渗处理及多次差异贴壁法进行纯化，倒置相差显微镜和苏木精-伊红(HE)染色观察细胞生长和形态
【机 构】
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上海市计划生育科学研究所药理毒理学研究室,中国生育调节药物毒理检测中心,上海,200032
【出 处】
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中国毒理学会中药与天然药物毒理专业委员会第一次(2016年)学术交流大会
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目的：将分离、富集的精原细胞接种于制备好的支持细胞饲养层上进行培养，研究睾丸支持细胞对睾丸生精细胞体外培养的影响，同时检测雷公藤甲素对体外单独培养睾丸支持细胞、生精细胞以及两者体外共培养的毒性。方法：(1)取鼠龄16～22d的雄性ICR小鼠睾丸，采用胶原酶、透明质酸酶、胰蛋白酶和DNA酶消化分离支持细胞，经低渗处理及多次差异贴壁法进行纯化，倒置相差显微镜和苏木精-伊红(HE)染色观察细胞生长和形态，通过Fas-L免疫细胞染色法鉴定支持细胞。(2)另取鼠龄7～8天的雄性ICR小鼠睾丸，相同方法消化制备小鼠睾丸生殖细胞悬液，用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞，差异贴壁法进一步纯化，采用碱性磷酸酶染色和c-kit免疫细胞染色法鉴定精原细胞。(3)以经丝裂霉素C处理的Sertoli细胞作饲养层，观察SSCs的生长情况。(4)采用cck-8法检测不同剂量组雷公藤甲素对支持细胞、精原细胞以及两者体外共培养的毒性，计算半数抑制浓度(IC50)。
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目的:目前,对于何首乌是否存在肝毒性是一个存在争议的学术问题.近年来国内外均有由于不同需要服用何首乌后出现急、慢性肝损伤的临床文献报道.也见实验研究结果不一的文献报道.尽管导致肝损伤的原因及成分至今仍不明确,但未见在GLP条件下长期给予何首乌的系统安全性评价的文献报道.本研究旨在观察连续口服给予制何首乌后对正常大鼠的肝脏是否会产生毒性反应,对口服制何首乌的非临床安全性进行客观评价.方法:本研究完全
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