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目的:探索钙激活氯通道ANO1在原发性高血压中的作用.
方法:取正常WKY大鼠和自发性高血压大鼠(SHR)的胸腹主动脉及肠系膜小动脉,抽屉蛋白;取来自同处的动脉,做血管平滑肌细胞原代培养,抽提蛋白.将蛋白在SDS-PAGE上分离,做Western Blotting,用抗ANO1抗体,染出ANO1条带.用糖昔酶处理含有ANO1的蛋白提取液,然后做Western Blotting,检测ANO1分子量的变化。用血管紧张素Ⅱ处理血管平滑肌细胞,观察ANO1的表达(WesternBlotting)。用膜片钳的方法记录血管平滑肌细胞的全细胞钙激活氯电流。
结果:(1)SHR大鼠的血管平滑肌ANO1的表达明显高于正常大鼠:(2)SHR大鼠的血管平滑肌原代培养细胞ANO1的表达仍然高于正常大鼠:(3)SHR大鼠血管平滑肌细胞的全细胞钙激活氯电流比对照的增强;(4)糖苷酶处理血管平滑肌的蛋白提取液,可使ANO1蛋白的分子量降低25kDa。
结论:SHR大鼠的血管平滑肌高表达钙激活氯通道ANO1。