论文部分内容阅读
目的:分析洗涤方法和冻存温度对外周血单个核细胞(PBMC)内HCVRNA含量的影响。
方法:同一天内把17例血清HCVRNA阳性慢性丙型肝炎患者外周血单个核细胞,随机分成A组(6例)和B组(11例),A组把细胞分成2份后分别采用常规法及改良法洗涤细胞5次,并留取每次洗涤液及细胞;B组采用改良法洗涤细胞后把细胞分成2份,分别作为新鲜组和-20℃冻存组,然后采用离心柱型RNA提取法和实时荧光定量PCR(FQPCR)检测洗涤液和细胞中HCVRNA含量。
结果:(1)洗涤完3次时,常规法有1份洗涤液HCV为阳性,改良法均为阴性:与第1次洗涤液相比,改良法再洗涤1次的病毒含量下降幅度明显高于常规法;(2)新鲜组与冻存组HCVRNA含量不存在明显差异,SpearmanS相关系数为0.93,P<0.01。
结论:洗涤PBMC以采用改良法洗涤3次为宜:-20℃简易冻存6周的PBMC标本仍可用于FOPCR检测。