【摘 要】
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目的：构建可示踪的防龋DNA疫苗pVAX1-SA-EGFP,观察其是否在真核细胞HepG-2中表达。方法：通过基因重组技术将基因片段egfp和连接肽基因片段克隆入载体pVAX1-SA中,并与pVAX1-SA中的目的基因片段spap/A形成融合基因,构建重组质粒pVAX1-SA-EGFP,利用电泳和测序验证重组质粒的大小、序列；脂质体介导转染HepG-2细胞,荧光显微镜观察增强绿色荧光蛋白的表达,免
【机 构】
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563000 遵义医学院口腔学院;563000遵义,贵州省高等学校口腔疾病研究特色重点实验室 56
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目的：构建可示踪的防龋DNA疫苗pVAX1-SA-EGFP,观察其是否在真核细胞HepG-2中表达。方法：通过基因重组技术将基因片段egfp和连接肽基因片段克隆入载体pVAX1-SA中,并与pVAX1-SA中的目的基因片段spap/A形成融合基因,构建重组质粒pVAX1-SA-EGFP,利用电泳和测序验证重组质粒的大小、序列；脂质体介导转染HepG-2细胞,荧光显微镜观察增强绿色荧光蛋白的表达,免疫组化检测目的蛋白的表达。结果：测序结果证实基因片段egfp以及连接肽基因片段连接人载体pVAX1-SA中,荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白的表达,免疫组化检测到目的蛋白的表达。结论：成功构建了可示踪防龋疫苗pVAX1-SA-EGFP,为防龋疫苗的免疫机制研究奠定一定的基础。
其他文献
目的：观察乳铁蛋白(LF)对经牙龈卟啉单胞菌脂多糖(P.gingivalis-LPS)刺激的人牙周膜细胞(hPDLCs)表达TLR-4、TLR-2及分泌IL-6和IL-8的影响,探索LF调节脂多糖激发的牙周炎症免疫过程的可能.方法：空白对照组不加任何刺激,于0h提取总RNA；LPS组加入0.1 μg· mL-1 P.gingivalis-LPS；LPS+LF组在加入LPS前2h,加入10 μg·
目的：对后牙复合树脂充填修复体进行4年临床研究,利用改良USPHS标准和激光三维扫描法,评价和分析后牙复合树脂充填修复体的耐磨性及其与胎面边缘适合性的相关性.方法：根据纳入和排除标准选取2008年5月至2009年1月于我科就诊的49名患者,每位患者至少有2颗患牙需要充填修复.所选患牙分别用BeautifilⅡ(BF,Shofu公司,日本)和Filtek Z350(3M ESPE,美国)及配套粘接系
目的：建立牙体裂纹的离体牙模型与数据模型。方法：根据热胀冷缩原理,利用牙本质与牙釉质膨胀系数不同,在不同温度变化和不同接触方式下制作人工裂纹。选取新鲜的完整离体后牙(n=12),分为4组。第一组：温度-80℃～90℃,湿包裹,程序降温；第二组：温度-80℃～90℃,湿包裹；第三组：温度-196℃～90℃,湿包裹；第四组：温度-196℃～90℃,无包裹。操作时除外第一组采用程序降温的办法,其他组均将
目的：通过CBCT研究和比较上颌双侧第一前磨牙的根管解剖形态,以了解对侧同名牙的特殊结构,有利于离体或在体研究中选择基线一致的牙,也便于临床医生了解更多对侧同名牙的形态特点.方法：收集104位患者的成对上颌第一前磨牙(共208颗)CBCT影像资料,通过One Volume Viewer软件分析比较来自同一患者的对侧同名牙的牙根数、根管数、根管类型、根管工作长度、根管弯曲情况.利用配对t检验和秩和检
病历摘要:患者,女,33岁,无系统疾病史.因修复科转诊至我科行根管再治疗左上后牙.常规降胎,去除冠方原充填物,揭全髓室顶后,术中探及近颊2个根管(MB1、MB2)、远颊2个根管(DB1、DB2)及腭侧1个根管,共5个根管,其中腭侧根管内探及原根管充填物.R-Endo器械去除腭侧根管原充填物后,常规机用镍钛Mtwo根管预备后,试尖,热牙胶连续波充填技术行根管充填,术后一周行冠修复,术后2月回访无任何
目的：探讨无定形磷酸钙加入渗透树脂后对树脂颜色稳定性的影响.方法：通过脱矿液建立人工龋模型，使用渗透树脂(A组)及加入了无定形磷酸钙的渗透树脂(B组)对模型进行渗透并使用紫外线照射对标本进行老化.通过计算老化前后的ΔE(色差值)来探讨纳米无定形磷酸钙加入渗透树脂后对树脂颜色稳定性的影响.结果：两组在经紫外线照射后颜色均发生了变化，且ΔE随着照射时间的延长而增大；经过24小时的照射后，两组的颜色趋于
Objective: Dental caries is the most common chronic childhood disease in the world.However, there has been few knowledge about the oral microbiota of childhood from different races.The aim of the stud
口腔微生物群落可通过微生物间的相互作用维持稳定,维护口腔健康.近期研究表明,从口腔健康人群分离出的非变链类链球菌——寡发酵链球菌可以通过生成过氧化氢来抑制变形链球菌.目的：菌斑微环境pH值是龋发病的一个关键因素,本研究的目的就是观察pH环境对生物膜中寡发酵链球菌和变形链球菌间拮抗作用的影响.方法：将寡发酵链球菌和变形链球菌单独接种、或者以1∶1比例混合接种于96孔板中,采用主动黏附模型(activ
目的：环二腺苷酸(c-di-AMP)是一个新发现的第二信使分子,调控多种细菌生理活动,如调节细菌的生长及毒性、细胞膜稳定性和耐受应激的能力等.目前该分子在口腔主要致龋菌变异链球菌中的研究还是空白.故本研究试图探索c-di-AMP信号系统在变链中的潜在作用.方法：通过生物信息学分析,SmDacA (SMU.1428c)可能是一个潜在的腺苷酸环化酶.该蛋白在大肠杆菌中得到外源性的表达和纯化,通过高效液
随着对龋病认识的不断深化,目前采用非手术干预性治疗或微创技术治疗龋病成为可能.其前提是对龋病进行早期诊断.早期发现龋病损害首先是通过使用规范化探针,作肉眼观察,按国际通行标准ICDAS进行记录.更为客观的检查方法包括影像技术、电学技术,增强视觉技术和荧光技术,这些方法有助于发现早期龋损,并能对龋损程度进行定量诊断.