【摘 要】
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目的：研究肌纤形成调节因子-1 (MR-1)通过促进心肌细胞微丝修复减轻低氧/复氧(H/R)引起的心肌细胞损伤.方法：在原代培养的乳大鼠心肌细胞H/R模型上,采用乳酸脱氢酶活性测定和CCK-8测定检测细胞损伤和细胞活力,以RT-PCR检测MR-1、肌球蛋白调节型轻链-2(MLC-2)的mRNA水平,以Western blotting检测MR-1、纤维状/球状肌动蛋白(F-/G-actin)、磷酸化
【机 构】
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中国人民解放军总医院病理生理研究室,北京 100853
【出 处】
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中国微循环学会2014年全国学术会议
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目的：研究肌纤形成调节因子-1 (MR-1)通过促进心肌细胞微丝修复减轻低氧/复氧(H/R)引起的心肌细胞损伤.方法：在原代培养的乳大鼠心肌细胞H/R模型上,采用乳酸脱氢酶活性测定和CCK-8测定检测细胞损伤和细胞活力,以RT-PCR检测MR-1、肌球蛋白调节型轻链-2(MLC-2)的mRNA水平,以Western blotting检测MR-1、纤维状/球状肌动蛋白(F-/G-actin)、磷酸化肌球蛋白调节型轻链激酶(p-MLCK)、磷酸化MLC-2和MLC-2蛋白水平,以细胞荧光染色法检测纤维状肌动蛋白(F-actin)和α-辅肌动蛋白(α-actinin)排列.研究过表达或敲低MR-1对心肌细胞H/R引起细胞损伤的影响及其与MLCK/MLC-2途径的关系.结果：H/R引起心肌细胞损伤,心肌细胞活力降低,F-actin和α-actinin排列紊乱.过表达MR-1减轻H/R引起的细胞损伤和细胞活力降低,F-actin和α-actinin排列整齐,其F-/G-actin比值较H/R高22.4％(P＜0.01),并增加H/R诱导的MLCK和MLC-2磷酸化、MLC-2 mRNA和蛋白表达,较H/R组分别高19.1％、29.6％、26.8％和24.8％(P＜0.01).敲低MR-1加重H/R引起的细胞损伤和细胞活力降低,F-actin和α-actinin排列紊乱加重,F-/G-actin比值较H/R低10.1％ (P＜0.01),并下调H/R诱导的MLCK和MLC-2磷酸化、MLC-2 mRNA和蛋白表达,较H/R组分别低13.1％、37.6％、18.8％和55.9％(P＜0.01).结论：MR-1通过激活MLCK/MLC-2途径修复微丝,减轻H/R引起的心肌细胞损伤.
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