【摘 要】
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氧化应激是指机体在遭受各种有害刺激时,氧化程度超出机体氧化物的清除能力,氧化系统和抗氧化系统失衡,从而导致组织损伤.引起机体氧化应激主要分为内源性和外源性两种因
【机 构】
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广东省农业科学院 动物科学研究所,畜禽育种国家重点实验室,农业部动物营养与饲料(华南)重点开放实验室,广东省动物育种与营养公共实验室,广东省畜禽育种与营养研究重点实验室,广州510640
【出 处】
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中国畜牧兽医学会家禽学分会第十一届优质鸡的改良生产暨发展研讨会
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氧化应激是指机体在遭受各种有害刺激时,氧化程度超出机体氧化物的清除能力,氧化系统和抗氧化系统失衡,从而导致组织损伤.引起机体氧化应激主要分为内源性和外源性两种因素,内源性包括：疾病感染、肠道系统的炎症.外源性包括：日粮营养水平和环境条件.建立成功可靠的氧化应激模型,对于揭示氧化应激机制以及研究抗氧化应激调控技术的作用机制有着重要的意义.本文用不同浓度的过氧化氢(0、1mM、500μM、400μM、300μM、200μM、100μM)作用原代鸡小肠上皮细胞(IEC)24h 后,通过利用Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂盒检测细胞存活率,分光光度法测定丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性,来确定过氧化氢的最佳作用浓度,构建体外IEC 氧化应激细胞模型.结果表明,过氧化氢对于细胞存活率有显著影响(P<0.05),由显微镜中观察,发现1mM 过氧化氢组细胞基本都已凋亡.100μM-500μM 过氧化氢组呈现浓度越大,细胞凋亡率越高.CCK-8 的试验结果显示,过氧化氢各处理组的细胞存活率均显著低于对照组(P<0.05).生化指标测定结果显示,过氧化氢处理对于MDA含量和SOD 活性均有显著影响,100μM-500μM 过氧化氢组细胞中的MDA 含量均高于对照组,且有剂量依赖性的趋势,其中400μM、500μM 过氧化氢组MDA 含量显著高于对照组(P<0.05),而SOD 的结果与MDA 相反,其中400μM、500μM 过氧化氢组SOD 活性显著的低于对照组(P<0.05).综合以上结果得出,过氧化氢的最佳作用浓度400-500μM,作用细胞的时间为24h,可以成功构建以过氧化氢为氧化应激诱导剂的IEC 细胞体外氧化应激模型.
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