【摘 要】
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目的为了研究三氯乙烯诱导的差异蛋白SET在肝细胞L-02中的相互作用,构建了癌蛋白SET和His标签融合表达的真核表达载体pcDNA3.1(+)/SET-His。方法从L-02肝细胞中提取总RNA,采
【机 构】
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深圳市疾病预防控制中心毒理研究室;
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(30571557)
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目的为了研究三氯乙烯诱导的差异蛋白SET在肝细胞L-02中的相互作用,构建了癌蛋白SET和His标签融合表达的真核表达载体pcDNA3.1(+)/SET-His。方法从L-02肝细胞中提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增SET-His编码区序列,将双酶切后纯化的序列定向克隆至pcDNA3.1/zeo(+),阳性克隆用双酶切和测序鉴定进行鉴定。结果:经双酶切和测序分析证实pcDNA3.1(+)/SET-His真核表达载体构建成功。结论:成功构建pcDNA3.1(+)/SET-His融合蛋白表达载体,为研究SET在三氯乙烯致肝细胞L-02中毒的蛋白质相互作用和从蛋白质水平上研究三氯乙烯致机体中毒的机理奠定了基础。
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